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文檔簡介
1、蜂膠是工蜂采集膠源植物樹脂等分泌物與其上顎腺、蠟腺等分泌物混合形成的膠粘性物質。蜂膠復雜的化學成分是蜂膠具有多種生物學活性和藥理活性的物質基礎,復雜的化學成分與植物來源密切相關。
抗氧化活性是蜂膠重要的生物學活性之一,一直是研究的熱點。然而,對不同植物來源蜂膠發(fā)揮抗氧化作用的分子機制的相關研究較少。我們采用楊樹膠、中國楊樹型蜂膠、巴西酒神菊屬型蜂膠(巴西綠蜂膠)以及澳大利亞桉樹型蜂膠的乙醇提取物對比研究蜂膠的抗氧化活性及其分子
2、機制。研究結果如下:
1.采用化學分析方法對比研究楊樹膠乙醇提取物(EEPG)、中國楊樹型蜂膠乙醇提取物(EECP)、桉樹型蜂膠乙醇提取物(EEEP)和酒神菊屬型蜂膠(巴西綠蜂膠)乙醇提取物(EEBGP)的總黃酮、總酚酸以及黃烷酮和黃烷酮醇含量,并采用高效液相色譜法測定多種主要化合物的含量。結果表明,EECP和EEPG成分相近,但EECP的成分含量高于EEPG,EEBGP的成分與EECP和EEEP差異較大,而EEEP與EECP
3、相近,但EECP的成分多于EEEP。
2.采用化學分析方法對比研究EECP、EEPG、EEBGP和EEEP的自由基清除能力和還原力。結果表明,EECP的自由基清除能力強于EEPG,EEEP的自由基清除活性最強,而EEBGP最弱。
3.采用RAW264.7細胞模型,運用流式細胞術研究EECP、EEPG、EEBGP和EEEP對H2O2誘導產生ROS的清除活性,發(fā)現(xiàn)EECP的ROS清除活性最強,采用qRT-PCR和west
4、ern bolt進一步研究EECP、EEPG、EEBGP和EEEP對抗氧化基因HO-1、GCLM、GCLC和TrxR1基因在mRNA水平和蛋白水平表達的作用,結果表明,EECP、EEPG、EEBGP和EEEP都能在一定程度上激活HO-1、GCLM、GCLC和TrxR1基因的表達,對GCLC的激活效果最弱。EEBGP對抗氧化基因的激活效果最強,EECP次之,EEEP最弱。
4.采用RAW264.7細胞模型,研究MAPKs激酶和轉
5、錄因子Nrf2在EECP、EEPG、EEBGP和EEEP激活抗氧化基因表達過程中的調節(jié)作用。發(fā)現(xiàn)EECP、EEPG和EEEP通過Erk激酶-Nrf2-抗氧化基因通路發(fā)揮抗氧化作用,而EEBGP通過p38、Erk激酶-Nrf2-抗氧化基因通路發(fā)揮抗氧化作用。
綜上所述,EECP、EEPG、EEBGP和EEEP通過直接清除ROS以及激活MAPKs-Nrf2通路而促進抗氧化基因的表達兩條途徑發(fā)揮抗氧化作用,同時,EECP、EEPG、
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