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1、顯齒蛇葡萄,俗稱藤茶,系葡萄科蛇葡萄屬顯齒蛇葡萄科,為顯齒蛇葡萄科的嫩莖葉,是具有很大開發(fā)潛力的野生植物資源。本文對(duì)顯齒蛇葡萄黃酮化合物兩種提取工藝進(jìn)行優(yōu)化研究,同時(shí)系統(tǒng)地研究了顯齒蛇葡萄不同溶劑提取物的抗氧化活性,研究了其不同組分抗氧化活性的規(guī)律。主要研究?jī)?nèi)容如下:
1、超聲輔助提取工藝優(yōu)化
以顯齒蛇葡萄黃酮化合物得率為考察指標(biāo),通過(guò)試驗(yàn)確定最適于顯齒蛇葡萄黃酮化合物提取的溶劑為乙醇。通過(guò)單因素試驗(yàn),確定顯齒蛇葡萄
2、黃酮化合物得率較佳的各因素條件:液料比25:1~35:1、超聲溫度58℃~72℃、乙醇濃度65%~75%、超聲時(shí)間35min~45min、超聲功率240w、粉碎粒度60目。
在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,選取影響程度最顯著的4個(gè)因素液料比、超聲溫度、乙醇濃度、超聲時(shí)間,運(yùn)用響應(yīng)面法,進(jìn)行顯齒蛇葡萄黃酮化合物超聲波提取條件的優(yōu)化。據(jù)所得二次回歸模型,確定顯齒蛇葡萄黃酮化合物的最佳超聲提取條件為:液料比29.4:1,超聲溫度66.10℃,
3、提取劑濃度73%,超聲時(shí)間41min,顯齒蛇葡萄黃酮化合物得率為15.161%。
2、超聲輔助仿生提取工藝優(yōu)化研究
以顯齒蛇葡萄黃酮化合物得率為考察指標(biāo),基于有效成分得率和經(jīng)濟(jì)成本角度綜合考慮,篩選出最適于顯齒蛇葡萄黃酮化合物提取的酶類為纖維素酶,最適pH為5.0。通過(guò)單因素試驗(yàn),確定顯齒蛇葡萄黃酮化合物得率較佳的各因素條件:加酶量1.2%、粉碎粒度60目、提取溫度65℃~75℃、提取時(shí)間15min~25min、超聲
4、功率150W~210W、液料比100:1~120:1。
在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,選取影響程度最顯著的4個(gè)因素提取時(shí)間、提取溫度、液料比、超聲功率,運(yùn)用響應(yīng)面法,進(jìn)行顯齒蛇葡萄黃酮化合物超聲輔助仿生提取條件的優(yōu)化。據(jù)所得二次回歸模型,確定顯齒蛇葡萄黃酮化合物的最佳超聲輔助仿生提取條件為:提取時(shí)間22min,提取溫度71.80℃,液料比111.20:1,超聲功率180W,顯齒蛇葡萄黃酮化合物得率為15.728%,效果優(yōu)于超聲波有機(jī)溶
5、劑提取法。
3、顯齒蛇葡萄不同溶劑提取物中黃酮含量測(cè)定
在顯齒蛇葡萄乙醇、水、甲醇、丙酮、乙酸乙酯及石油醚提取物中,黃酮化合物占其比重大小依次為:乙醇提取物>甲醇提取物>丙酮提取物>水提取物>乙酸乙酯提取物>石油醚提取物。
4、不同溶劑提取物抗氧化活性研究
對(duì)顯齒蛇葡萄不同溶劑提取物的總抗氧化能力、對(duì)ABTS·+、DPPH·、·OH、O2·-清除能力及抗脂質(zhì)過(guò)氧化能力進(jìn)行研究,乙醇提取物總抗氧化能
6、力及對(duì)DPPH·、·OH、O2·-清除效果最佳(總抗氧化能力為90.23mg/mL,其余指標(biāo)IC50值依次為7.85mg/L、17.94 mg/L、13.09 mg/L),乙酸乙酯提取物對(duì)ABTS·+清除能力最強(qiáng)(TEAC值為8.97 mmol/g),石油醚提取物抗脂質(zhì)過(guò)氧化效果最明顯(IC50值為141.18)。
5、抗氧化能力與黃酮含量相關(guān)性研究
研究所得結(jié)論:顯齒蛇葡萄不同提取物總抗氧化能力及對(duì)DPPH·、·O
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