粘附分子、IL-8及其受體在哮喘豚鼠的表達變化及其對中性粒細胞粘附遷移能力的影響研究.pdf

1、目的：研究哮喘豚鼠中P-selectin與其受體L-selectin、IL-8與其受體CXCR1/CXCR2、CD11a與其受體ICAM-1的表達改變是否影響中性粒細胞的粘附遷移。
　　方法：沿用我室前期實驗方法構建哮喘豚鼠模型，購買30只8-10周齡健康雄性豚鼠，隨機分為3組：對照組、哮喘組、哮喘治療組(治療組)。收集各組豚鼠BALF、腹主動脈血進行白細胞分類計數。ELISA檢測BALF與血清中IL-8濃度。提取各組豚鼠肺組織，

2、通過免疫組織化學方法檢測各組豚鼠肺血管內皮細胞上P-selectin、ICAM-1表達及定位。分離各組豚鼠腹主動脈血中性粒細胞，進行后續(xù)血中性粒細胞上相關蛋白檢測：通過Western blot方法檢測CXCR1、CXCR2、L-selectin蛋白表達水平，采用Realtime-PCR方法檢測CXCR1、CXCR2、L-selectin的mRNA水平，利用Transwell小室檢測中性粒細胞的遷移能力，粘附實驗檢測中性粒細胞的粘附能力，

3、流式細胞術檢測CD11a的表達。
　　結果：1.各組豚鼠在霧化激發(fā)過程中的不同反應：對照組豚鼠顯得安然無恙，無任何異常癥狀。哮喘組及治療組豚鼠出現典型的哮喘癥狀，如：咳嗽、抓鼻、點頭呼吸、呼吸急促等,且哮喘組癥狀更明顯。2.各組豚鼠BALF及血中中性粒細胞、嗜酸性粒細胞比例結果顯示：哮喘組較對照組、治療組的中性粒細胞、嗜酸性粒細胞比例及數目均明顯升高,差異均有統計學意義（P＜0.01）。3.各組豚鼠血中性粒細胞CXCR1、CXCR

4、2、L-selectin的蛋白表達結果顯示：哮喘組較對照組、治療組表達均明顯增多，差異均有統計學意義（P＜0.01）。4.各組豚鼠血清及BALF中IL-8表達結果顯示：哮喘組較對照組、治療組表達均明顯增多，差異均有統計學意義（P＜0.01）。5.各組豚鼠血中性粒細胞CXCR1、CXCR2、L-selectin的mRNA表達結果顯示：哮喘組較對照組、治療組表達均明顯增多，差異均有統計學意義（P＜0.01）。6.各組豚鼠肺組織P-selec

5、tin、ICAM-1免疫組化結果顯示：哮喘組較對照組、治療組表達均明顯增多，差異均有統計學意義（P＜0.01）。7.各組豚鼠血中性粒細胞的遷移能力結果顯示：哮喘組較對照組、治療組遷移能力均明顯增強，差異均有統計學意義（P＜0.01）。8.各組豚鼠血中性粒細胞粘附能力結果顯示：哮喘組較對照組、治療組粘附能力均明顯增強，差異均有統計學意義（P＜0.01）。9.各組豚鼠血中性粒細胞上CD11a的表達結果顯示：哮喘組較對照組、治療組表達均明顯增

6、多，差異均有統計學意義（P＜0.01）。
　　結論：1.哮喘豚鼠P-selectin與其受體L-selectin、IL-8與其受體CXCR1/CXCR2、CD11a與其受體ICAM-1的表達均明顯增多。
　　2.L-selectin、P-selectin、ICAM-1、CD11a、CXCR1、CXCR2、IL-8的表達上調可增強中性粒細胞的粘附遷移能力。3.哮喘豚鼠氣道中性粒細胞的增多可能是通過以上粘附分子、趨化因子及其受體