異養(yǎng)小球藻篩選、培養(yǎng)及其脂肪酸產(chǎn)物的研究.pdf

1、Studyonthescreening，cultureandfattyacidproductofheterotrophicChlorellaByAuthorLiAoboUndertheSupervisionofProfessorWangPingSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementsFortheMaster’SDegreeSchoolofFoodandChemicalEngineeri

2、ngBeijingTechnologyandBusinessUniversityJune201l摘要脂肪酸在小球藻藻粉中的含量約為20％40％，有著巨大的開發(fā)潛力。白養(yǎng)小球藻培養(yǎng)的問題關(guān)鍵在于難以實(shí)驗(yàn)高密度大規(guī)模培養(yǎng)。而異養(yǎng)小球藻可以在無光照條件下生長于有機(jī)物溶液中，大幅度提高了小球藻的生長速度，能夠獲得很大的藻生物量。因此本文就篩選異養(yǎng)小球藻及對其培養(yǎng)條件的優(yōu)化，以及對其重要產(chǎn)物脂肪酸的提取進(jìn)行了研究，以期為實(shí)現(xiàn)小球藻的工業(yè)化大規(guī)模生

3、產(chǎn)和應(yīng)用提供有價值的參考。在天然水體中篩選得到l株能高速異養(yǎng)生長的藻株WLZH。用掃描電鏡對藻株進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)分析，并結(jié)合分子生物學(xué)鑒定，初步確定藻株WLZH屬于小球藻屬(Chlorellasorokiniana)。對藻株進(jìn)行環(huán)境因子單因素試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)溫度、KN03和葡萄糖的濃度對藻株生長影響顯著；異養(yǎng)小球藻對初始pH值適應(yīng)范圍廣。實(shí)驗(yàn)最佳生長條件下，藻株270、藻株WLZH每升溶液中培養(yǎng)9天能夠獲得最大藻粉干重分別為52509、53379

4、。藻粉中粗脂采用乙醚／對石油醚提取，經(jīng)正交實(shí)驗(yàn)，確定了2mL的無水乙醚和石油醚(1：1，v／v)，超聲波震蕩萃取6min(T作頻率40kHz，超聲功率100W)，提取溫度20℃。在優(yōu)化的提取條件下提取異養(yǎng)小球藻藻株270和藻株WLZH，每克藻粉中粗脂含量分別為0395lg、044559。經(jīng)GCMS測定：藻株270和藻株WLZH中含有十六碳烯酸、硬脂酸、亞油酸和亞麻酸。通過對三種酯化方法的比較，選擇了酸堿酯化法為最佳酯化方法。對亞油酸的提