小球藻的自養(yǎng)培養(yǎng)及其產物中多不飽和脂肪酸的研究.pdf

1、多不飽和脂肪酸(PUFAs)在營養(yǎng)和醫(yī)學領域有著重要作用。目前PUFAs主要從魚油中提取，工藝復雜，價格昂貴。小球藻中含有豐富的多不飽和脂肪酸，因此利用微藻，尤其是自養(yǎng)小球藻，可以吸收CO2轉化生產多不飽和脂肪酸具有廣闊的前景。
　　本文采用中國淡水藻種庫的三株小球藻(藻株1068、270、40)和實驗室自行篩選的三株小球藻（藻株WLZ-8、14、24），通過設計L9(34)正交實驗（ρNa2CO3、初始pH值、N/P）對培養(yǎng)條件

2、進行優(yōu)選;培養(yǎng)過程中以碳酸鈉為碳源，硝酸鈉為氮源，磷酸二氫鉀為磷源。通過設計單因素實驗（接種量、溫度、光照強度、鹽度）對影響小球藻自養(yǎng)培養(yǎng)的環(huán)境因素進行探索。實驗中以小球藻的生物量、生長速率、世代時間、細胞密度為指標，確定最佳培養(yǎng)條件。在優(yōu)化培養(yǎng)條件下，六株小球藻的12天生物量分別為0.425、0.388、0.275、0.298、0.327、0.303g/L。
　　本文利用乙醚-石油醚法對小球藻產物中的多不飽和脂肪酸進行提取，采用

3、酸堿結合甲酯化法對多不飽和脂肪酸進行預處理。為提高測定樣品預處理的效率，本文通過設計L9(34)正交實驗（ρKOH-甲醇、皂化時間、ρH2SO4-甲、酯化時間）和單因素實驗對預處理條件進行優(yōu)選。最終確定樣品預處理的最優(yōu)條件是ρKOH-甲醇為0.5mol/L，皂化時間為l0min，ρH2SO4-甲醇為5％，酯化時間為8min。測定過程中的RSD為0.7％-3.1％，六株小球藻粉經乙醚-石油醚提取以及甲酯化過程的加標回收率55.5％-82.

4、7％。
　　本文建立了多不飽和脂肪酸的GC/MS的定性定量測定方法。經GC/MS對樣品進行初步分析確定藻粉中主要產物為C16H30O2、 C18H36O2、 C18H32O2和C18H30O2。其出峰時間依次分別為15'95、20'24、20'45和21'00。
　　通過加標回收率折算，六株小球藻粉種PUFAs的實際產量分別為10.66mg/g藻粉、20.52mg/g藻粉、10.72mg/g藻粉、11.64mg/g藻粉、26