網(wǎng)狀原角藻(Protoceratium reticulatum)的鑒定與毒素檢測研究.pdf

1、分類號分類號密級UDC編號碩士學位論文網(wǎng)狀原角藻（Protoceratiumreticulatum）的鑒定與毒素檢測研究韋寧1212014指導教師姓名梁玉波研究員趙文教授專業(yè)名稱水生生物學論文答辯日期年月日學位授予日期年月日摘要蝦夷扇貝毒素(YessotoxinsYTXs)是近年來發(fā)現(xiàn)的一類聚醚類海洋生物毒素，主要由甲藻門中的網(wǎng)狀原角藻產(chǎn)生，另外多邊舌甲藻和具刺膝溝藻也被報道可產(chǎn)此類毒素。此前世界多個國家和地區(qū)均有檢出，該毒素不像傳統(tǒng)的

2、腹瀉性貝毒會引起腹瀉效應，但會對心、肝臟、神經(jīng)系統(tǒng)等組織器官造成損傷，是一種對人類和生態(tài)系統(tǒng)具有潛在危害的脂溶性毒素。我國于近年來首次檢出了YTX及其衍生物，但至今未有網(wǎng)狀原角藻或其他兩種產(chǎn)毒藻藻華的報道。本文選取于大連長海海域分離鑒定的一株網(wǎng)狀原角藻，通過光學顯微鏡和電子顯微鏡對其形態(tài)學信息進行描述，采取單細胞PCR分析其ITS序列信息；使用液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法(LCMS)對其游動細胞和底棲孢囊的產(chǎn)毒狀況進行定性定量分析；并對二者的周年

3、種群動態(tài)，以及該海域蝦夷扇貝的YTXs進行分析。從形態(tài)學分析上看，該藻長略大于寬，平均長度為33.5μm，平均寬度為29.5μm，光鏡下可見游泳的鞭毛和黃綠色色素體；在熒光顯微鏡下可見各甲板上具有小孔的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，其甲片式為：3’1a6’’6’’’1p1’’’’；ITS序列表明，該藻株與日本的網(wǎng)狀原角藻藻株親緣關(guān)系最近。通過進行LCMS毒素分析，本藻株的游動細胞可產(chǎn)YTX，平均每細胞產(chǎn)毒量為101.25pg并有少量的HomoYTX產(chǎn)生，底

4、棲孢囊和游動細胞的毒素組分一致，但毒素含量遠高于游動細胞，平均每細胞產(chǎn)YTX的量為8910.78pg。網(wǎng)狀原角藻的游動細胞具有明顯的季節(jié)分布特征，在春季，細胞豐度逐月上升，四月份達到最高，之后快速減少，五月份僅有極少量檢出，此后再無檢出。而孢囊則呈現(xiàn)近雙峰形的趨勢，在3月和7月各出現(xiàn)了一個高值，而最低值則出現(xiàn)在9月。蝦夷扇貝體內(nèi)的YTXs在整年的樣品中均有檢出，其趨勢與孢囊豐度的變化相似，但相對而言有滯后的現(xiàn)象。在5月和10月各有一個峰

5、值出現(xiàn)。但從整年數(shù)據(jù)來看，長海海域蝦夷扇貝體內(nèi)YTXs含量不高，未超過歐盟規(guī)定的1mgKg食用安全標準綜上所述，網(wǎng)狀原角藻是長海海域一種可產(chǎn)YTXs的有毒赤潮藻類。該藻主要出現(xiàn)在春季，是一種在低水溫下即可產(chǎn)生藻華的甲藻。且底棲孢囊很可能是蝦夷扇貝所含YTX的主要來源。以上研究是國內(nèi)首次對YTXs產(chǎn)毒藻類的生物學和生態(tài)學信息進行描述，其結(jié)果可以為網(wǎng)狀原角藻種群的監(jiān)測、毒素分析提供參考方法；為有關(guān)部分合理制定監(jiān)測預警策略，為有效降低網(wǎng)狀原角