腦轉移瘤中Musashi1及Numb的表達及意義.pdf

1、目的：通過檢測腦轉移瘤中腫瘤干細胞標志物Musashi1（Msi1）及Numb的表達情況，探討二者在腦轉移瘤發(fā)生發(fā)展中的作用，進一步明確腫瘤干細胞在腦轉移瘤形成中的作用，以期為腦轉移瘤發(fā)病的分子生物學機制提供新的思路與方向。
　　方法：
　　1.選取51例經手術切除的腦轉移瘤標本，29例原發(fā)腫瘤標本，15例正常人腦組織標本。一部分置于10％福爾馬林溶液中固定，常規(guī)制作蠟塊保存；另一部分在新鮮狀態(tài)下放入-80℃低溫冰箱中保存。

2、
　　2.設定腦轉移瘤組與原發(fā)腫瘤組為實驗組，正常腦組織組為對照組。采用免疫組織化學 SP法及逆轉錄-聚合酶鏈反應（Reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR）的方法分別對 Msi1與Numb蛋白及mRNA在各組織中進行檢測。每張切片隨機取10個高倍視野，在高倍鏡（×400）下依據染色強度分數進行半定量分析；對電泳圖像中的目的基因mRNA表達水平進行半定量分析，測

3、定目的基因灰度值，以內參GAPDH的OD值標化目的基因的OD值，作為相對表達量，進行統計學分析。
　　3.收集所有患者的詳細資料，應用統計軟件SPSS21.0對實驗數據進行統計學分析，計量資料用t檢驗，計數資料用χ2檢驗，等級資料用Spearman相關分析進行檢驗，連續(xù)變量資料用Pearson相關分析進行檢驗，以上均為雙側檢驗，以P＜0.05表示差異具有統計學意義。
　　結果：
　　1.Msi1蛋白及mRNA在不同組織

4、中表達情況
　　免疫組化結果顯示：Msi1蛋白在腦轉移瘤、原發(fā)腫瘤及正常腦組織中的陽性表達率分別為60.8%（31/51）、65.5%（19/29）及13.3%（2/15）。其中Msi1蛋白在腦轉移瘤與原發(fā)腫瘤間的表達差異不明顯，不具有統計學意義（P>0.05）；Msi1蛋白在腦轉移瘤中的表達顯著高于在正常腦組織中的表達，差異具有統計學意義（P<0.05）；Msi1蛋白在原發(fā)腫瘤中的表達顯著高于在正常腦組織中的表達，差異具有統計學

5、意義（P<0.05）。
　　RT-PCR結果顯示：Msi1 mRNA在腦轉移瘤、原發(fā)腫瘤及正常腦組織中的相對表達量分別為0.78±0.50、0.60±0.36及0.38±0.29。其中Msi1 mRNA在腦轉移瘤與原發(fā)腫瘤間的表達差異不明顯，不具有統計學意義（P>0.05）；Msi1 mRNA在腦轉移瘤中的表達顯著高于在正常腦組織中的表達，差異具有統計學意義（P<0.05）；Msi1 mRNA在原發(fā)腫瘤中的表達顯著高于在正常腦組織

6、中的表達，差異具有統計學意義（P<0.05）。
　　2.Numb蛋白及mRNA在不同組織中表達情況
　　免疫組化結果顯示：Numb蛋白在腦轉移瘤、原發(fā)腫瘤及正常腦組織中的陽性表達率分別為33.3%（17/51）、31.0%（9/29）及73.3%（11/15）。其中Numb蛋白在腦轉移瘤與原發(fā)腫瘤間的表達差異不明顯，不具有統計學意義（P>0.05）；Numb蛋白在腦轉移瘤中的表達顯著低于在正常腦組織中的表達，差異具有統計學意

7、義（P<0.05）；Numb蛋白在原發(fā)腫瘤中的表達顯著低于在正常腦組織中的表達，差異具有統計學意義（P<0.05）。
　　RT-PCR結果顯示：Numb mRNA在腦轉移瘤、原發(fā)腫瘤及正常腦組織中的相對表達量分別為0.34±0.21、0.47±0.31及2.42±1.82。其中Numb mRNA在腦轉移瘤與原發(fā)腫瘤間的表達差異不明顯，不具有統計學意義（P>0.05）；Numb mRNA在腦轉移瘤中的表達顯著低于在正常腦組織中的表達

8、，差異具有統計學意義（P<0.05）；Numb mRNA在原發(fā)腫瘤中的表達顯著低于在正常腦組織中的表達，差異具有統計學意義（P<0.05）。
　　3.Msi1與Numb在腦轉移瘤中表達相關性分析
　　在腦轉移瘤組織中，蛋白表達經Spearman相關性分析，Msi1蛋白與Numb蛋白的表達呈負線性相關（r=-0.258, P<0.05）；基因表達經Pearson相關性分析， Msi1基因與Numb基因mRNA相對表達呈負線性相

9、關（r=-0.345，P＜0.05）。
　　4.Msi1與Numb在腦轉移瘤中的表達與患者臨床病理資料間的分析
　　Msi1與Numb在腦轉移瘤中的表達情況與患者的性別、年齡及組織來源均無關（均P＞0.05）。
　　結論：
　　1.Msi1蛋白及mRNA在腦轉移瘤及原發(fā)腫瘤中高表達；Numb蛋白及mRNA在腦轉移瘤及原發(fā)腫瘤中低表達，說明二者表達異?？赡茉谀X轉移瘤形成過程中發(fā)揮重要作用。
　　2.Msi1與