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文檔簡介
1、目的:為探討腦星形細胞瘤環(huán)氧化酶-2(COX-2)表達情況及對瘤細胞血管生成、增殖、凋亡及侵襲性的影響,進一步探討COX-2在星形細胞瘤發(fā)生發(fā)展中的作用。 材料與方法:收集河北大學附屬醫(yī)院神經(jīng)外科2002年6月-2005年3月手術(shù)治療的68例星形細胞瘤病人(其中男性37例、女性31例)的手術(shù)標本,年齡4-71歲,平均年齡38.12歲。另取腦外傷后開顱內(nèi)減壓術(shù)中切除的正常腦組織5例作為對照。按WHO(2000)神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類標準
2、明確病理診斷(分類和分級)。本研究68例腦星形細胞瘤中,Ⅰ級18例(均為毛細胞性星形細胞瘤),Ⅱ級15例(纖維性星形細胞瘤5例,原漿性星形細胞瘤3例,肥胖細胞性星形細胞瘤3例,室管膜瘤4例),Ⅲ級16例(間變性星形細胞瘤10例,間變性室管膜瘤6例),Ⅳ級19例(膠質(zhì)母細胞瘤11例,髓母細胞瘤8例)。采用免疫組化技術(shù)檢測5例正常腦組織、68例星形細胞瘤組織中COX-2及PCNA、Mcl-1、MMP-2、VEGF的表達情況。 免疫組
3、化結(jié)果判定,以陽性腫瘤細胞的百分比和染色強度綜合評價免疫組化染色結(jié)果。陽性腫瘤細胞的百分比通過400倍高倍鏡下至少5個視野確定,并按以下5個范圍計分:陽性細胞百分數(shù)評分:0(0-4%),1(5-24%),2(25-49%),3(50-74%)和4(75-100%)。腫瘤細胞免疫染色的強度按如下計分:無色為0分、淺黃色為1分、棕黃色為2分、棕褐色為3分;陽性腫瘤細胞的百分比和染色強度相乘產(chǎn)生每個病例的加權(quán)分數(shù),即免疫組化染色指數(shù)=陽性細胞
4、數(shù)×染色強度。0分為陰性(-),1-2分為弱陽性(+),3-4分為中等陽性(++),4分以上為強陽性(+++)。PCNA陽性腫瘤細胞核呈棕黃色,400倍鏡下進行觀察,每個標本組織片隨機觀察5個視野,每個視野數(shù)200個細胞。分別計算每一病例的陽性染色的腫瘤細胞與所測腫瘤細胞的比例,作為增殖指數(shù)(ProloferationIndex,PI)。 統(tǒng)計分析使用SPSS12.0軟件包。增殖指數(shù)用均數(shù)士標準差表示。對免疫組化結(jié)果采用卡方檢驗
5、,t檢驗和單因素方差分析統(tǒng)計學方法。 結(jié)果: 1COX-2在腦星形細胞瘤及正常腦組織中的表達 5例正常腦組織中COX-2蛋白表達均為陰性,COX-2在腦星形細胞瘤細胞中的胞漿染色陽性,68例星形細胞瘤組織COX-2的表達陽性率為61.8%(42/68)。COX-2的表達強度和星形細胞瘤的病理分級呈正相關(guān)(X2=14.24,P<0.01)。經(jīng)X2檢驗顯示,COX-2在高級別星形細胞瘤(Ⅲ、Ⅳ級)與低惡性星形細胞瘤的
6、表達均具有差異性,具有統(tǒng)計學意義((X2=0.52,P>0.05)。 2VEGF在腦星形細胞瘤及正常腦組織中的表達 5例正常腦組織中VEGF蛋白表達均為陰性,VEGF蛋白主要分布在瘤細胞胞漿內(nèi),VEGF在人腦星形細胞瘤中的表達率72.1%(49/68)。在各級別星形細胞瘤之間,VEGF的表達強度均有顯著性差異(X2=18.02,P<0.01),VEGF的表達和病理分級呈正相關(guān)關(guān)系。 腫瘤組織微血管密度MVD在各級
7、別星形細胞瘤之間表達強度均有顯著性差異(X2=15.02,P<0.01),微血管密度隨著腫瘤級別的升高而升高。 COX-2的表達和VEGF的表達成正相關(guān)(X2=4.02,P<0.01),COX-2和MVD成正相關(guān)。 3PCNA在腦星形細胞瘤及正常腦組織中的表達 68例腦星形細胞瘤的標本中均可見PCNA的陽性表達,陽性率為100%。增殖指數(shù)(PI)的范圍是1-42%,單因素方差分析示各級別星形細胞瘤之間PI均有顯著
8、性差異(F=89.98,P<0.01),PI與星形細胞瘤分級有關(guān),即星形細胞瘤的惡性程度越高,增殖指數(shù)越高。COX-2的表達和PCNA的表達成正相關(guān)(X2=3.98,P<0.01)。 4Mcl-1在腦星形細胞瘤及正常腦組織中的表達 Mcl-1正常腦組織表達為陰性。本組68例腦星形細胞瘤中Mcl-1表達的總陽性率為73.5%(50/68),不同病理分級的腦星形細胞瘤中Mcl-1的表達有統(tǒng)計學意義,存在顯著性差異(X2=8.
9、48,P<0.05)。Mcl-1的表達率在高、低級別的腦星形細胞瘤中的差異有顯著性意義(X2=9.31,P<0.01),即隨著星形細胞瘤惡性度增高,相應表達水平增高,Ⅲ、Ⅳ級(高級別)明顯高于Ⅰ、Ⅱ級(低級別)。COX-2與Mcl-1蛋白表達有正相關(guān)性(X2=4.08,P<0.05)。 5MMP-2在腦星形細胞瘤及正常腦組織中的表達 MMP-2在正常腦組織中未見明顯染色。在星形細胞瘤組織中陽性率為72.1%(49/68)
10、,MMP-2在星形細胞瘤中的表達隨著病理級別的增加而增強,經(jīng)X2檢驗顯示,MMP-2在低惡性星形細胞瘤(Ⅰ、Ⅱ級)的表達與高級別星形細胞瘤(Ⅲ、Ⅳ級)的表達具有差異性,具有統(tǒng)計學意義((X2=2.52,P<0.05)。COX-2與MMP-2蛋白表達有正相關(guān)性(X2=4.17,P<0.05)。 結(jié)論: 1正常腦組織COX-2及Mcl-1,VEGF和MMP-2均呈陰性表達。 2COX-2蛋白在星形細胞瘤過度表達,并與
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