CRY1在人腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及意義.pdf

1、前言: 膠質(zhì)瘤是顱內(nèi)最常見的原發(fā)腫瘤，約占顱內(nèi)腫瘤的40％-43％。近年來，隨著分子生物學(xué)、分子遺傳學(xué)等學(xué)科的發(fā)展，發(fā)現(xiàn)了許多與腫瘤發(fā)生，發(fā)展和預(yù)后密切相關(guān)的基因，并嘗試用基因治療的方法來改善膠質(zhì)瘤的療效。生物晝夜節(jié)律普遍存在于各種生物體，由于生物節(jié)律基因的發(fā)現(xiàn)和對其活動(dòng)規(guī)律的揭示，使對生物晝夜節(jié)律的研究獲得突破性進(jìn)展。生物節(jié)律基因通過調(diào)控、干擾癌基因、抑癌基因、生物周期、血管內(nèi)皮生長因子及對于內(nèi)分泌通路的作用，多方面參與了腫瘤

2、的發(fā)生和發(fā)展。通過對腫瘤與晝夜節(jié)律、生物節(jié)律基因間關(guān)系的了解，使進(jìn)一步研究明確晝夜節(jié)律的發(fā)生與腫瘤發(fā)生、發(fā)展有關(guān)的分子機(jī)制，對臨床腫瘤的診斷、判斷腫瘤的預(yù)后及轉(zhuǎn)歸等方面具有重要意義，為臨床應(yīng)用腫瘤的時(shí)間治療提供了理論依據(jù)。 腫瘤的發(fā)生為多基因受累的結(jié)果，包括抑癌基因的失活和癌基因的活化兩方面。CRY1基因是在研究哺乳動(dòng)物DNA修復(fù)光解酶過程中發(fā)現(xiàn)的，屬于植物藍(lán)光感受器和光解酶家族的成員，CRY1基因是一種主要的生物節(jié)律調(diào)控基因，

3、是反饋環(huán)唯一的負(fù)調(diào)節(jié)因子，對細(xì)胞調(diào)控基因表達(dá)的嚴(yán)格時(shí)間程序起了重要作用，尤其是維持了細(xì)胞自穩(wěn)態(tài)通路反饋環(huán)的正常工作，CRY1基因編碼的蛋白是一種核蛋白，能穩(wěn)定per蛋白的結(jié)構(gòu)，能直接與PER蛋白結(jié)合將其從胞漿轉(zhuǎn)運(yùn)至核內(nèi)，它們能通過與Clock-Bmall-Ebox直接或間接的相互作用抑制Clock-Bmall介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)錄，參與生物節(jié)律調(diào)節(jié)的負(fù)反饋環(huán)。后者影響抑癌基因(負(fù)向調(diào)控)失活或原癌基因(正向調(diào)控)表達(dá)，使其失去正常晝夜節(jié)律，進(jìn)而

4、導(dǎo)致細(xì)胞癌變。通過對CRY1的深入研究有可能會(huì)發(fā)現(xiàn)它在參與腫瘤，尤其是膠質(zhì)瘤的發(fā)生及進(jìn)展等方面的重要作用，因此本研究目的在于通過檢測人腦膠質(zhì)瘤組織中CRY1蛋白及mRNA的表達(dá)來明確其在人腦膠質(zhì)瘤的發(fā)生及進(jìn)展過程中的作用。 材料及方法: 本實(shí)驗(yàn)采集62例臨床手術(shù)切除的不同部位腦膠質(zhì)瘤組織標(biāo)本以及15對照腦組織標(biāo)本(腦外傷內(nèi)減壓術(shù)后標(biāo)本)，腫瘤組織術(shù)前均未經(jīng)過放化療，送大體病理學(xué)檢查后標(biāo)本立即置液氮內(nèi)速凍，-70℃貯存，用

5、以Western Blot及半定量RT-PCR方法檢測CRY1蛋白及mRNA的表達(dá)。 結(jié)果: CRY1蛋白及mRNA在人腦膠質(zhì)瘤組織與對照腦組織中表達(dá)量有顯著性差異。在人腦膠質(zhì)瘤組織中RT-PCR方法檢測CRY1 mRNA的相對表達(dá)量為1.91±0.23，在對照腦組織中CRY1 mRNA的相對表達(dá)量為2.77±0.16，Western Blot方法檢測膠質(zhì)瘤中CRY1蛋白的相對表達(dá)量為1.87±0.33，對照腦組織中CR

6、Y1蛋白的相對表達(dá)量為2.94±0.46，在兩種組織中CRY1 mRNA及蛋白相對表達(dá)量差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而且，CRY1基因在人腦膠質(zhì)瘤組織中的過低表達(dá)與腫瘤病理分級相關(guān)，其中在Ⅲ-Ⅳ級膠質(zhì)瘤組中的表達(dá)明顯低于Ⅰ級和Ⅱ級，隨腫瘤級別增加CRY1蛋白及mRNA表達(dá)均呈下降趨勢。 結(jié)論: 人腦膠質(zhì)瘤組織中CRY1蛋白及mRNA表達(dá)水平均明顯降低，兩者結(jié)果一致，這種表達(dá)降低與膠質(zhì)瘤的發(fā)生及臨床病理分級密切相關(guān)，CRY1可