RSK4在胰腺癌中的表達(dá)及其臨床病理意義.pdf

1、目的：
　　胰腺癌(Pancreatic cancinoma，PC)是消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一，其發(fā)病率近十幾年來(lái)有所增加，雖然在全球和我國(guó)的惡性腫瘤發(fā)病排行榜上均居十名之后，但死亡率卻均占惡性腫瘤死亡排行榜第7位，死亡率極高。RSK4是核糖體S6激酶(Ribosomal S6 kinase，RSK)家族成員之一，在大腦、腎臟、心臟、骨骼肌中表達(dá)量豐富，其在組織的發(fā)育過(guò)程中發(fā)揮重要作用。目前發(fā)現(xiàn)RSK4在大多數(shù)腫瘤中表達(dá)下調(diào)，可能作為

2、抑癌基因參與腫瘤發(fā)生發(fā)展的過(guò)程。目前國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)RSK4 mRNA在胰腺癌組織中的表達(dá)及RSK4與胰腺癌預(yù)后關(guān)系的報(bào)道，故本研究通過(guò)免疫組化方法檢測(cè)RSK4在胰腺癌細(xì)胞系中的表達(dá)情況，通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄和實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Reversetranscription and quantitative real-time polymerase chain reaction, RT-qPCR)和免疫組化方法檢測(cè)RSK4 mRNA和蛋白在胰腺癌組織中的

3、表達(dá)情況，并分析其與臨床病理參數(shù)的關(guān)系，探討其臨床病理診斷價(jià)值及預(yù)后意義。
　　方法：
　　(1)常規(guī)培養(yǎng)3株胰腺癌細(xì)胞系及1株正常胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞系，并分別制成細(xì)胞蠟塊，用免疫組化方法檢測(cè)RSK4蛋白的表達(dá)。
　　(2)收集廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科2010年1月至2013年6月經(jīng)病理確診的50例胰腺癌存檔蠟塊標(biāo)本，其中30例對(duì)應(yīng)癌旁胰腺組織作為對(duì)照，收集患者臨床病理資料及隨訪資料。
　　(3)使用RT-q

4、PCR和免疫組化法分別檢測(cè)RSK4 mRNA和蛋白在50例胰腺癌及30例癌旁胰腺組織中的表達(dá)情況;通過(guò)繪制受試者工作特征(Receiver operating characteristic，ROC)曲線(xiàn)，根據(jù)曲線(xiàn)下面積判斷RSK4mRNA的診斷價(jià)值;分析RSK4 mRNA和蛋白的表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系，探討其臨床病理意義。
　　(4)使用Kaplan-Meier法和COX比例風(fēng)險(xiǎn)模型分析胰腺癌患者預(yù)后影響因素。
　　結(jié)果：

5、
　　(1) RSK4蛋白在3株胰腺癌細(xì)胞系和1株正常胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞系中均無(wú)表達(dá)。
　　(2) RSK4 mRNA在胰腺癌組織中的相對(duì)表達(dá)量為0.634±0.2315，癌旁胰腺組織中的相對(duì)表達(dá)量為1.080±0.3423; RSK4 mRNA在胰腺癌組織中的相對(duì)表達(dá)量明顯低于癌旁胰腺組織(P＜0.05)。ROC曲線(xiàn)下面積為0.695(95％CI:0.540～0.853，P＜0.05)，診斷界值為0.12，靈敏度和特異度分別

6、為64％和43.3％。RSK4 mRNA的表達(dá)與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)(r=-0.364，P＜0.05)，而與患者性別、年齡、吸煙史、飲酒史、糖尿病史、血清CA199、CEA、腫瘤部位、腫瘤大小、腫瘤分化程度、有無(wú)神經(jīng)浸潤(rùn)、有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM臨床分期無(wú)關(guān)(P＞0.05)。
　　(3) RSK4蛋白在胰腺癌組織中陽(yáng)性率為28％(14/50)，在癌旁胰腺組織中陽(yáng)性率為50％(15/30);RSK4蛋白在胰腺癌組織中的陽(yáng)性率明顯低于癌旁胰腺組

7、織(P＜0.05);RSK4蛋白的表達(dá)與血清CA199有關(guān)(r=-0.288，P＜0.05)，而與患者性別、年齡、吸煙史、飲酒史、糖尿病史、CEA、腫瘤部位、腫瘤大小、腫瘤分化程度、有無(wú)神經(jīng)浸潤(rùn)、有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、有無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及TNM臨床分期無(wú)關(guān)(P＞0.05)。
　　(4)RSK4 mRNA和蛋白的表達(dá)具有相關(guān)性(Pearson列聯(lián)系數(shù)=0.282，P＜0.05)。
　　(5) RSK4 mRNA陽(yáng)性組中位生存期（19月）明

8、顯長(zhǎng)于陰性組（8月）(P＜0.05)，而RSK4蛋白對(duì)患者術(shù)后生存期無(wú)影響(P＞0.05)。RSK4 mRNA、腫瘤分化程度和TNM臨床分期是影響胰腺癌預(yù)后的獨(dú)立因素。
　　結(jié)論：
　　(1) RSK4蛋白在3株胰腺癌細(xì)胞系中無(wú)表達(dá)，而RSK4 mRNA和蛋白在胰腺癌組織中低表達(dá)，尤其在有轉(zhuǎn)移和血清CA199升高的組織中表達(dá)更低，提示RSK4可能參與胰腺癌的進(jìn)展及轉(zhuǎn)移調(diào)控。
　　(2) RSK4 mRNA對(duì)胰腺癌的診斷