促卵泡刺激素通過調(diào)控顆粒細(xì)胞分泌干細(xì)胞因子促進(jìn)卵泡發(fā)育成熟的研究.pdf

1、目的：
　　研究成熟卵泡與未成熟卵泡中促卵泡刺激素受體（FSHR）及干細(xì)胞因子（SCF）的表達(dá)情況，探究顆粒細(xì)胞中FSHR及SCF的表達(dá)與卵泡成熟是否有關(guān)；研究不同濃度的重組促卵泡刺激素（rFSH）對體外培養(yǎng)的人卵巢顆粒細(xì)胞的SCF信使RNA（mRNA）及蛋白表達(dá)是否有影響；探討人卵巢顆粒細(xì)胞中促卵泡刺激素調(diào)節(jié)干細(xì)胞因子分泌的機(jī)制。
　　方法：
　　實(shí)驗(yàn)性研究。收集行卵胞漿內(nèi)單精子顯微注射技術(shù)（ICSI）患者（均為輸卵

2、管因素或男方因素）的顆粒細(xì)胞，以成熟卵泡及未成熟卵泡來源分組，分別檢測兩組顆粒細(xì)胞中FSHR及SCF的表達(dá)情況；對行體外受精-胚胎移植技術(shù)（IVF-ET）后的卵泡液來源的顆粒細(xì)胞進(jìn)行不同濃度的rFSH（果納芬；10IU/L，25 IU/L，50 IU/L，100 IU/L，200IU/L）干預(yù)培養(yǎng)，與空白對照組（正常培養(yǎng)）一同檢測FSHR及SCF的表達(dá)情況；用含有rFSH、環(huán)磷酸腺苷激動(dòng)劑（cAMP）及PKA抑制劑（H-89）的培養(yǎng)基培

3、養(yǎng)IVF卵泡液來源的顆粒細(xì)胞，將細(xì)胞分為6組：空白對照組，rFSH單獨(dú)培養(yǎng)組，H-89單獨(dú)培養(yǎng)組，cAMP單獨(dú)培養(yǎng)組，H-89聯(lián)合cAMP培養(yǎng)組，H-89聯(lián)合rFSH培養(yǎng)組。用Real-time PCR，細(xì)胞免疫熒光技術(shù)及Western blot檢測人顆粒細(xì)胞中FSHR及SCF的蛋白和mRNA水平。
　　結(jié)果：
　　未成熟卵泡來源的顆粒細(xì)胞中的FSHR及SCF的表達(dá)比成熟卵泡來源顆粒細(xì)胞中較低；用不同劑量的rFSH干預(yù)培養(yǎng)顆