甲減的血清核磁共振代謝組學研究及不同劑量右歸丸療效對比.pdf

1、目的:
　　臨床研究部分:通過對甲減患者和健康志愿者的血清進行代謝組學檢測，分析甲減患者內(nèi)源性代謝產(chǎn)物差異，從代謝組學角度探討甲狀腺機能減退的生物學本質(zhì)，并分析差異性代謝產(chǎn)物可能涉及的代謝通路。
　　動物實驗研究部分:通過丙基硫氧嘧啶灌胃大鼠造模，以甲功為判斷標準，從代謝組學角度對比甲狀腺功能正常與減退的SD大鼠血清，尋找相關的生物標志物，分析甲減疾病發(fā)病的特征代謝物，觀察不同劑量右歸丸對實驗性甲減大鼠的作用，尋求中醫(yī)治療的

2、可能機制或作用靶點，了解中藥的量效關系，尋找最佳治療劑量方案。
　　方法:
　　用1H-NMR的代謝組學技術結(jié)合模式識別方法和SIMCA-P12.0統(tǒng)計分析方法，臨床研究部分:收集健康組及甲減組患者血漿樣品，分析甲減患者潛在的生物標志物。動物實驗部分:通過丙硫灌胃造成實驗性甲減大鼠模型，以甲功為標準，分析正常組及實驗性甲減大鼠的血清代謝物的特征及變化。并在此甲減模型基礎上給甲減組大鼠中成藥右歸丸2月，通過與給予甲減組大鼠優(yōu)甲

3、樂2月后的治療效果對比，分析不同劑量中成藥右歸丸對實驗性甲減大鼠的血清代謝物的特征及變化。
　　結(jié)果:
　　一、臨床研究部分:
　　正常組與甲減組患者血清代謝譜有不同的代謝特征。與正常對照組相比，甲減患者血清中的不飽和脂肪酸、三羧酸循環(huán)代謝物（α-酮戊二酸和丙酮酸）、膽堿、瓜氨酸、3-羥基丁酸的含量降低。苯丙氨酸、酪氨酸、丙氨酸、糖蛋白升高。
　　二、動物實驗部分:
　　（一）甲功方面:
　　1.造模

4、后:與正常組相比，給予造模藥組大鼠在造模后出現(xiàn)類似于甲減腎陽虛的行為學改變，且給予造模藥組FT4、FT3數(shù)值較正常組明顯下降(P＜0.01)，TSH值較正常組升高(P＜0.05)，提示甲減模型成功。
　　2.給予治療藥后:
　　(1)FT3:西藥組、右歸丸中劑量組和正常組相比差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，與模型組相比，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，均已恢復正常值，而右歸丸低劑量組、右歸丸高劑量組與正常組相比，差異有

5、統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，與模型組相比，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，均未恢復正常值;
　　(2) FT4:各中藥給藥組均低于正常組值，且各中藥給藥組和正常組相比差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，與模型組相比，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，表明各中藥給藥組FT4均未恢復正常值，而西藥組顯著高于正常組，且差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，表明優(yōu)甲樂對于甲減大鼠具有較強升高FT4作用;
　　(3)TSH:西藥組與正常

6、組相比，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，與模型組相比差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，表明西藥組TSH已恢復正常，各中藥給藥組與正常組比差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，與模型組相比，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，表明各中藥給藥組TSH未恢復正常。
　?。ǘ┐x組學方面:
　　1.造模后:與正常組相比，我們發(fā)現(xiàn)造模后的SD大鼠血清代謝產(chǎn)物存在差異:血液中的與正常對照組相比，給予造模藥大鼠血清中肌酐、乳酸、LDL/VL

7、DL、N-乙酰糖蛋白的含量升高，不飽和脂肪酸、三羧酸循環(huán)代謝物（檸檬酸、α-酮戊二酸和琥珀酸）、磷酸膽堿、瓜氨酸、3-羥基丁酸、O-乙酰糖蛋白的含量降低。
　　2.給予治療藥后:與造模后治療前相比，各治療組血清中三羧酸循環(huán)產(chǎn)物（檸檬酸、α-酮戊二酸，琥珀酸）、瓜氨酸含量上升，乳酸含量下降，右歸丸中劑量組、高劑量組、西藥組差異具有統(tǒng)計學意義，而右歸丸低劑量組與治療前相比，差異無統(tǒng)計學意義;西藥組及各中藥治療組大鼠血清中LDL/VLD

8、L較前降低，但西藥組差異具有統(tǒng)計學意義，其余各中藥治療組差異無統(tǒng)計學意義;不飽和脂肪酸、磷酸膽堿、3-羥基丁酸在各治療組大鼠血清中含量均較前升高，但只有西藥組差異具有統(tǒng)計學意義，其余各中藥治療組差異無統(tǒng)計學意義;肌酐在各治療組中大鼠血清中含量均較前降低，差異具有統(tǒng)計學意義;N-乙酰糖蛋白在西藥組大鼠血清中含量較前降低，差異有統(tǒng)計學意義，在中藥各治療組大鼠血清中含量較前差異不明顯，無統(tǒng)計學意義;0-乙酰糖蛋白在各治療組中大鼠血清中含量較前

9、均升高，差異具有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)論:
　　一、臨床研究部分:
　　甲減患者中存在著能量代謝、脂代謝、氨基酸代謝、苯丙氨酸代謝、丙氨酸-葡萄糖代謝方面的異常，經(jīng)代謝組學檢測，甲減患者中有差異的代謝產(chǎn)物:膽堿，不飽和脂肪酸、3-羥基丁酸、丙氨酸、α-酮戊二酸、丙酮酸、苯丙氨酸、酪氨酸、糖蛋白、瓜氨酸。這些化合物可能成為鑒別甲減的客觀指標，為甲減前期診斷提供了參考。
　　二、實驗研究部分:
　?。ㄒ唬┙o予造模

10、藥后大鼠出現(xiàn)甲減腎陽虛的行為學改變，其甲功臨床指標FT3、FT4水平降低，TSH水平升高，均有統(tǒng)計學意義，從大鼠的癥狀，血清中三種甲狀腺激素水平看，甲減的模型成功。
　?。ǘ仃栄a腎中藥右歸丸對甲減模型大鼠具有較好的治療作用，各治療組均能不同程度鼓舞陽氣，改善其甲減癥狀，促進機體的功能活動，中等劑量的右歸丸能改善低水平甲狀腺激素，從而對甲減具有防治作用。
　　（三）經(jīng)核磁共振檢測，甲減模型組大鼠與正常組大鼠血漿代謝譜存在差