利福平對(duì)大鼠全腦缺血性腦損傷的作用及機(jī)制研究.pdf

1、背景與目的： Nrf2是重要的抗氧化應(yīng)激核轉(zhuǎn)錄因子，研究表明氧化應(yīng)激在全腦缺血/再灌注的發(fā)病過程中起著關(guān)鍵作用。有研究發(fā)現(xiàn)利福平可以通過抗氧化應(yīng)激作用對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病發(fā)揮保護(hù)作用，且機(jī)制與其抗氧化應(yīng)激作用有關(guān)。但其在全腦缺血/再灌注損傷中的研究尚未見報(bào)道。本研究旨在探討利福平在全腦缺血/再灌注損傷中是否具有保護(hù)作用及其對(duì)抗氧化應(yīng)激核轉(zhuǎn)錄因子Nrf2的潛在影響。
　　方法：所有SD大鼠隨機(jī)分為4組：假手術(shù)組（Sham），3個(gè)干預(yù)組

2、[全腦缺血再灌注組（I/R），利福平處理組（Rif），利福平+鴉膽子苦醇處理組（Rif+Bru），鴉膽子苦醇為Nrf2的特異性抑制劑]。所有干預(yù)組大鼠均接受雙側(cè)頸總動(dòng)脈夾閉合并系統(tǒng)性低血壓作全腦缺血處理，20分鐘后行再灌注。Rif組術(shù)后30分鐘起接受利福平溶液i.p.；Rif+Bru組在術(shù)前30分鐘接受鴉膽子苦醇i.c.v.，其余處理同Rif；I/R組術(shù)后接受等量的生理鹽水腹腔注射；Sham組僅暴露雙側(cè)頸總動(dòng)脈和右側(cè)頸總靜脈，不作缺血處

3、理。采用Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)術(shù)后大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力，HE染色觀察大鼠海馬 CA1亞區(qū)錐體細(xì)胞病理學(xué)改變， TUNEL染色檢測(cè)凋亡的錐體細(xì)胞，激光共聚焦檢測(cè) Nrf2的亞細(xì)胞定位，WB測(cè)定大鼠海馬Nrf2，HO-1和 COX-2的表達(dá)變化。
　　結(jié)果：Rif組大鼠在Morris水迷宮中的表現(xiàn)明顯優(yōu)于I/R組，尋臺(tái)潛伏期縮短，垮臺(tái)次數(shù)增多；HE染色顯示海馬 CA1區(qū)完整的錐體細(xì)胞增多，核固縮的細(xì)胞較少；TUNEL染色顯示凋亡

4、的細(xì)胞數(shù)目減少；免疫印跡顯示核轉(zhuǎn)錄因子Nrf2表達(dá)增強(qiáng)，核轉(zhuǎn)位增加，其下游靶蛋白HO-1上調(diào)，COX-2表達(dá)下調(diào)。有趣的是，利福平的上述作用在術(shù)前給予側(cè)腦室注射Nrf2特異抑制劑鴉膽子苦醇時(shí)被消除。
　　結(jié)論：利福平對(duì)全腦缺血再灌注誘發(fā)的腦損傷有明顯的神經(jīng)保護(hù)作用，主要表現(xiàn)在增強(qiáng)大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力，減少神經(jīng)元死亡，激活Nrf2/HO-1通路，促進(jìn)Nrf2的表達(dá)和核轉(zhuǎn)位，進(jìn)而增加其下游產(chǎn)物HO-1的表達(dá)和減少COX-2的含量，從