ERK在大鼠局灶性腦缺血中的表達(dá)及腦心通對(duì)缺血性腦損傷的保護(hù)機(jī)制.pdf

1、目的：建立大鼠可逆性大腦中動(dòng)脈栓塞(middlecerebralarteryocclusion，MCAO)模型，觀察局灶性腦缺血不同再灌注時(shí)間段神經(jīng)行為學(xué)、腦梗死體積、組織學(xué)變化、神經(jīng)元凋亡和ERK表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律。 方法：將70只體重為250～300克健康雄性成年Wistar大鼠，隨機(jī)分成假手術(shù)組(sham組)、腦缺血再灌注組(ischemia-reperfusion，I/R組)；采用改良的線栓法制備大鼠大腦中動(dòng)脈栓塞2h再

2、灌注3h、6h、2411、48h、72h模型。I/R組每個(gè)時(shí)間段各9只鼠，sham組各5只。在預(yù)定時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分：腦梗死體積測(cè)定；HE染色觀察組織學(xué)變化；免疫組織化學(xué)方法研究海馬CA1區(qū)ERK的活性特征；TUNEL法檢測(cè)細(xì)胞凋亡的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律。 結(jié)果：1)sham組各時(shí)間段神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分均為0分；I/R組于再灌注早期(3h～6h)大鼠神經(jīng)功能缺損癥狀較重，于再灌注48h后癥狀明顯減輕：72h時(shí)，大部分大鼠已無明顯神經(jīng)功

3、能缺失癥狀。2)TTc染色檢測(cè)腦梗死體積，Sham組腦片均紅染，無白色梗死灶形成。I/R組再灌注3h時(shí)即可見明顯梗死灶：至再灌注24h梗死體積已達(dá)高峰：72h時(shí)梗死灶仍存在，但梗死體積較24h已有減小。3)HE染色顯示sham組可見大鼠神經(jīng)元數(shù)量多，排列整齊，形態(tài)完整；I/R組有神經(jīng)元細(xì)胞腫脹，分布不均，細(xì)胞周圍間隙增寬，有的細(xì)胞體積縮小，核固縮深染。4)ERK活性表達(dá)于再灌注后3h明顯增加，再灌注后6h達(dá)到高峰，72h恢復(fù)到正常水平。

4、除72hI/R組ERK活性表達(dá)與sham組比較無顯著差異外，其余I/R組ERK活性表達(dá)較sham組均有明顯增加。5)缺血再灌注組3h開始即出現(xiàn)染色為黃色的凋亡細(xì)胞，隨缺血時(shí)間延長，凋亡細(xì)胞增多，并有細(xì)胞核固縮、凋亡小體等凋亡中晚期形態(tài)特征出現(xiàn)。凋亡細(xì)胞數(shù)于48h達(dá)到高峰；72h以后凋亡細(xì)胞數(shù)逐漸減少。I/R組各時(shí)間段凋亡細(xì)胞數(shù)與sham組比較均有顯著性差異。 結(jié)論：腦缺血再灌注損傷可能導(dǎo)致ERK活性上調(diào)，參與缺血后神經(jīng)細(xì)胞凋亡過