ERK在大鼠局灶性腦缺血中的表達及腦心通對缺血性腦損傷的保護機制.pdf

1、目的：建立大鼠可逆性大腦中動脈栓塞(middlecerebralarteryocclusion，MCAO)模型，觀察局灶性腦缺血不同再灌注時間段神經行為學、腦梗死體積、組織學變化、神經元凋亡和ERK表達的動態(tài)變化規(guī)律。 方法：將70只體重為250～300克健康雄性成年Wistar大鼠，隨機分成假手術組(sham組)、腦缺血再灌注組(ischemia-reperfusion，I/R組)；采用改良的線栓法制備大鼠大腦中動脈栓塞2h再

2、灌注3h、6h、2411、48h、72h模型。I/R組每個時間段各9只鼠，sham組各5只。在預定時間點進行神經行為學評分：腦梗死體積測定；HE染色觀察組織學變化；免疫組織化學方法研究海馬CA1區(qū)ERK的活性特征；TUNEL法檢測細胞凋亡的動態(tài)變化規(guī)律。 結果：1)sham組各時間段神經行為學評分均為0分；I/R組于再灌注早期(3h～6h)大鼠神經功能缺損癥狀較重，于再灌注48h后癥狀明顯減輕：72h時，大部分大鼠已無明顯神經功

3、能缺失癥狀。2)TTc染色檢測腦梗死體積，Sham組腦片均紅染，無白色梗死灶形成。I/R組再灌注3h時即可見明顯梗死灶：至再灌注24h梗死體積已達高峰：72h時梗死灶仍存在，但梗死體積較24h已有減小。3)HE染色顯示sham組可見大鼠神經元數量多，排列整齊，形態(tài)完整；I/R組有神經元細胞腫脹，分布不均，細胞周圍間隙增寬，有的細胞體積縮小，核固縮深染。4)ERK活性表達于再灌注后3h明顯增加，再灌注后6h達到高峰，72h恢復到正常水平。

4、除72hI/R組ERK活性表達與sham組比較無顯著差異外，其余I/R組ERK活性表達較sham組均有明顯增加。5)缺血再灌注組3h開始即出現染色為黃色的凋亡細胞，隨缺血時間延長，凋亡細胞增多，并有細胞核固縮、凋亡小體等凋亡中晚期形態(tài)特征出現。凋亡細胞數于48h達到高峰；72h以后凋亡細胞數逐漸減少。I/R組各時間段凋亡細胞數與sham組比較均有顯著性差異。 結論：腦缺血再灌注損傷可能導致ERK活性上調，參與缺血后神經細胞凋亡過