曲馬多在家兔體內(nèi)的死后彌散及犬保存檢材中的分解動(dòng)力學(xué)研究.pdf

1、目的:
　　 1.建立曲馬多死后分布、死后彌散研究動(dòng)物模型和保存檢材中曲馬多分解動(dòng)力學(xué)研究(動(dòng)物)模型；
　　 2.研究曲馬多在家兔體內(nèi)的死后分布、死后彌散及保存檢材中的分解動(dòng)力學(xué)規(guī)律，為曲馬多中毒(死)案件的法醫(yī)學(xué)鑒定提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法:
　　 1.死后分布家兔6只，經(jīng)灌胃勻速注入10LD50曲馬多。觀察生命體征變化，待呼吸和心跳全部消失時(shí)，迅速解剖，取心血、膽汁、玻璃體液、尿、右上肢肌肉、右下

2、肢肌肉、胸肌、心、肝、脾、肺、腎、腦、胃。GC/MS法定性、GC法定量檢測(cè)其中曲馬多。
　　 2.死后彌散取健康雄性家兔24只，隨機(jī)分為死后彌散組(15只)和劑量影響組(9只)。
　　 死后彌散組：將家兔空氣栓塞處死2h，1/4 LD50曲馬多灌胃染毒，分別于0.25h、0.5h、1h、3h、6h各隨機(jī)解剖3只動(dòng)物，取心血、周圍血、膽汁、尿、玻璃體液、右上肢肌肉、右下肢肌肉、胸肌、心、肝、脾、肺、腎、腦、胃，置于-20℃

3、冰箱內(nèi)保存待檢，GC/MS和GC法檢測(cè)其中曲馬多。
　　 劑量影響組：將家兔仰臥位固定于兔臺(tái)上，插胃管后，空氣栓塞處死；死后2h，分別以1/8 LD50(3只)、1/4 LD50(3只)和1/2 LD50(3只)曲馬多灌胃染毒，0.25h后解剖動(dòng)物，取心血、周圍血、膽汁、尿、玻璃體液、右上肢肌肉、右下肢肌肉、胸肌、心、肝、脾、肺、腎、腦、胃，置于-20℃冰箱內(nèi)保存待檢，GC/MS和GC法檢測(cè)其中曲馬多。
　　 3.保存檢

4、材中分解動(dòng)力學(xué)研究雄性犬6只，4LD50劑量曲馬多(0.228g/kg)灌胃后2h，經(jīng)股動(dòng)脈插管采血，肝素抗凝；夾閉氣管處死，取肝臟。每只犬血和肝均分為四等份，分別置于20℃、4℃、-20℃、20℃(血加NaF至1％，肝4％甲醛固定)保存，于第0h、7d、27d、53d，99d、156d、220d，GC/MS和GC法定性、定量檢測(cè)其中曲馬多。WinNorLin藥代動(dòng)力學(xué)軟件處理平均藥物濃度，AIC信息判據(jù)判定動(dòng)力學(xué)模型，擬合分解動(dòng)力學(xué)方

5、程，計(jì)算分解動(dòng)力學(xué)參數(shù)。
　　 結(jié)果:
　　 1.死后分布染毒后0.5±0.25h家兔出現(xiàn)中毒癥狀，2±0.5h后死亡。體內(nèi)曲馬多含量由高到低分別為腎(162.96±15.27μg/g)＞胃(135.27±14.48μ眺)、肝(130.22±53.65μg/g)、脾(112.48+14.16μg/g)＞肺(83.04±19.36μg/g)、腦(73.92±32.20μg/g)、心(71.86±12.16μg/g)、上肢肌

6、肉(57.63+19.92μg/g)、下肢肌肉(54.77±17.40μg/g)＞尿(1.44±0.07μg/mL)、膽汁(0.72±0.13μg/mL)、心血(.72±0.19μg/mL)、玻璃體液(0.38+0.05μg/mL)。
　　 2.死后彌散1/4LD50死后灌胃染毒0.25-6 h，家兔各組織臟器均可檢出曲馬多。染毒劑量增加可促進(jìn)死后彌散發(fā)生，死后灌胃染毒0.25h，除1/8LD50染毒家兔玻璃體液、膽汁、尿、腦、

7、肺、右上肢肌肉、右下肢肌肉均未檢出曲馬多外，其余所取臟器和體液中均檢出曲馬多；隨著死后染毒劑量的增加各檢材中檢出曲馬多含量增高。與10LD50染毒致死家兔相比，1/4LD50死后染毒0.25-6h內(nèi)，家兔各組織中曲馬多最高濃度均較染毒致死家兔低(P＜0.05)，體液中曲馬多最高濃度均較染毒致死家兔高(P＜0.05)；1/2LD50死后染毒0.25h，家兔各組織中曲馬多濃度均較染毒致死家兔低(P＜0.05)，體液中曲馬多濃度均較染毒致死家

8、兔高(P＜0.05)；1/8 LD50和1/4 LD50死后染毒0.25h時(shí)，家兔各組織和體液中曲馬多濃度均較染毒致死家兔低(P＜0.05)。
　　 3.保存檢材中分解動(dòng)力學(xué)不同條件保存血和肝中曲馬多含量均呈下降趨勢(shì)，20℃、4℃、-20℃、20℃(1％NaF)保存156d血中曲馬多含量顯著下降(p＜0.05)；20℃、4℃、-20℃、20℃(4％甲醛)保存至27d、53d、156d、27d曲馬多含量顯著下降(p＜0.05)；保

9、存至220d時(shí)，血和肝臟中曲馬多濃度分別顯者下降至最初濃度的41.9％(20℃)、41.3％(4℃)、50.0％(-20℃)、63.7％(20℃，1％NaF)和42.97％(20℃)、49.50％(4℃)、49.49％(-20℃)、55.63％(20℃，4％甲醛)。其分解動(dòng)力學(xué)符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)過(guò)程一室開(kāi)放模型，可用CT=Coe-KeT表示。保存血液中曲馬多的分解半衰期(t1/2)分別是200.5 d(20℃)、163.3d(4℃)、190

10、.9d(-20℃)和307.3 d(20℃，1％NaF)。保存肝臟中曲馬多的分解半衰期(t1/2)分別為137.8d(20℃)、175.2d(4℃)、268.8d(-20℃)和241.3d(20℃，4％甲醛)；根據(jù)CT=Coe-KeT方程計(jì)算的各樣本中曲馬多含量理論值與實(shí)測(cè)值接近。
　　 結(jié)論:
　　 1.采用10LD50劑量(兔)、1/8LD50、1/4LD50、1/2LD50劑量(兔)和4LD50劑量(犬)曲馬多灌胃

11、染毒，建立了曲馬多的死后分布、死后彌散、保存檢材中分解動(dòng)力學(xué)動(dòng)物模型，可應(yīng)用于曲馬多中毒(死)的法醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)和法醫(yī)毒物動(dòng)力學(xué)研究。
　　 2.10LD50劑量曲馬多染毒致死家兔體內(nèi)曲馬多含量由高到低分別為腎＞胃、肝、脾＞肺、腦、心、上肢肌肉、下肢肌肉＞尿、膽汁、心血、玻璃體液。提示除血、胃(胃內(nèi)容)外，腎、肝也是曲馬多中毒(死)案件法醫(yī)學(xué)鑒定中毒物分析的較好檢材，死后分布規(guī)律也可應(yīng)用于極端案件(如碎尸)血中曲馬多含量的推斷。

12、>　　 3.曲馬多在家兔體內(nèi)可發(fā)生死后彌散，且與染毒劑量的關(guān)。1/4LD50和1/2LD50死后染毒后3-6h和0.25h，家兔體內(nèi)曲馬多含量顯著高于4LD50劑量染毒致死家兔。曲馬多中毒(死)案件法醫(yī)學(xué)鑒定時(shí)，應(yīng)考慮死后彌散和死后再分布對(duì)毒物分析結(jié)果的影響，還應(yīng)排除死后染毒的可能性，死后彌散規(guī)律還可用于生前服藥和死后染毒的鑒別。
　　 4.曲馬多在保存犬血液和肝臟中可發(fā)生分解，含量呈下降趨勢(shì)，低溫保存和添加防腐劑(甲醛固定)

13、可減緩曲馬多的分解，使曲馬多含量下降減緩，分解半衰期延長(zhǎng)。曲馬多中毒(死)案件的法醫(yī)學(xué)鑒定中，檢材應(yīng)在一個(gè)月內(nèi)及時(shí)送檢和檢測(cè)，若不能及時(shí)送檢，應(yīng)冷凍保存或添加抑菌劑，并盡快檢驗(yàn)。
　　 5.曲馬多在不同條件保存血和肝臟中分解符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)過(guò)程一室開(kāi)放模型，在曲馬多中毒(死)案件法醫(yī)學(xué)鑒定時(shí)，可采用CT=Coe-KeT公式和分解動(dòng)力學(xué)參數(shù)推斷取材當(dāng)時(shí)體內(nèi)曲馬多濃度或送檢當(dāng)時(shí)檢材中曲馬多含量，為曲馬多中毒(死)案件法醫(yī)學(xué)鑒定提供科學(xué)