甲胺磷的法醫(yī)毒物動(dòng)力學(xué)研究——甲胺磷在犬體內(nèi)的死后分布、保存檢材和埋葬尸體中的分解動(dòng)力學(xué).pdf

1、目的：
　　 1.建立犬甲胺磷死后分布、保存檢材和埋葬尸體中的分解動(dòng)力學(xué)動(dòng)物模型；
　　 2.改進(jìn)甲胺磷氣相色譜檢測(cè)，建立其GC-FPD、氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)方法；
　　 3.研究甲胺磷在犬體內(nèi)的死后分布、保存檢材中的分解動(dòng)力學(xué)及埋葬尸體中的分解動(dòng)力學(xué)。
　　 方法：
　　 1.甲胺磷在犬體內(nèi)的死后分布研究：取犬6只，分別經(jīng)口灌胃染毒8LD50甲胺磷農(nóng)藥，死后迅速解剖動(dòng)物，取心、肝、脾、肺、腎、

2、腦、胃壁、心血、膽汁、胸肌、右后肢肌肉、右前肢肌肉等組織，放置于-20℃冰箱內(nèi)保存待檢，樣品經(jīng)酸處理后，二氯甲烷萃取，氣相色譜和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)，根據(jù)甲胺磷的特征離子峰、保留時(shí)間定性與內(nèi)標(biāo)法、工作曲線法定量，研究犬體內(nèi)的甲胺磷分布情況。
　　 2.甲胺磷在保存檢材中的分解動(dòng)力學(xué)研究：取犬3只，8倍LD50劑量甲胺磷灌胃染毒，死后立即解剖取肝和血，每只犬心血和肝分四等份，其中三份分別置于20℃、4℃、-20℃保存；另一份心血

3、中加氟化鈉至1％，另一份肝臟加4％甲醛溶液固定，20℃保存；分別于0小時(shí)、7天、16天、60天、180天檢測(cè)其中甲胺磷含量。
　　 3.甲胺磷在埋葬尸體中的分解動(dòng)力學(xué)研究
　　 (1)埋葬尸體中甲胺磷含量隨時(shí)間變化：取健康犬30只，8倍LD50劑量甲胺磷灌胃染毒致死。0d的立即解剖取材，其余裝入塑料袋，不封口，埋于太原市東山實(shí)驗(yàn)基地。分別于29天、58天、89天、139天、211天、225天挖出后，解剖，取材，GC-FP

4、D、GC/MS法檢測(cè)其中甲胺磷含量。
　　 (2)埋葬方式對(duì)甲胺磷在埋葬尸體中分解動(dòng)力學(xué)的影響：取健康犬9只，8倍LD50劑量甲胺磷灌胃染毒致死后隨機(jī)分成3組，分別裝入塑料袋、編織袋和木箱(棺材)中埋于實(shí)驗(yàn)基地，75天后挖出解剖取材，檢測(cè)其中甲胺磷的含量。
　　 (3)埋藏溫度(季節(jié))對(duì)甲胺磷在埋葬尸體中分解動(dòng)力學(xué)的影響：健康犬6只，其中3只于09/3/28以8倍LD50劑量甲胺磷灌胃染毒致死后埋葬，于75天后(09/6

5、/12)挖出，另3只同劑量同方式處死，于09/8/24埋葬，于75天(09/11/8)挖出。解剖取材，檢測(cè)各臟器中甲胺磷含量。
　　 結(jié)果：
　　 1.死后分布：
　　 研究結(jié)果顯示，8倍LD50灌胃致死犬體內(nèi)甲胺磷濃度由高到低分別為胃(99.84±30.87μg/g)＞脾(46.87±28.67μg/g)、肝(43.82±22.74μg/g)、腎(43.79±29.04μg/g)、心血(35.36±13.98μ

6、g/ml)、肺(35.25±18.59μg/g)、尿(34.81μg/g)＞胸肌(19.23±17.18μg/g)、右前肢(16.92±8.98μg/g)、心(15.09±6.11μg/gμg/g)、右后肢(12.83±7.63μg/g)、腦(10.91±4.13μg/g)＞膽汁(6.75±1.45μg/ml)、玻璃體液(6.2263±4.97μg/ml)(t檢驗(yàn)，p＜0.05)。
　　 2.保存檢材分解動(dòng)力學(xué)：
　　

7、不同條件保存血和肝中甲胺磷含量均呈下降趨勢(shì)，20℃、4℃、-20℃、20℃(1％NaF)保存第7天、16天、7天和4天犬血中甲胺磷含量顯著下降至初始濃度的55.1±18.2％、16.8±6.6％、61.5±11.0％和4.2±3.5％(p＜0.05)；20℃、4℃、-20℃、20℃(4％甲醛)保存至7天、7天、16天、7天肝中甲胺磷含量顯著下降至初始濃度的25.8±12.7，36.7±16.8％、51.2±14.1％和6.9±2.2％(

8、p＜0.05)；20℃、4℃、-20℃、20℃(加NaF至1％)保存180天、180天、180天和12天犬血中甲胺磷濃度分別顯者下降至最初濃度的0.2±0.2％、1.4±1.2％、4.5±2.1％和0.6±0.2％；20℃、4℃、-20℃、20℃(4％甲醛)保存180天時(shí)，肝臟中甲胺磷濃度分別顯者下降至最初濃度的2.6±1.5％、2.9±1.1％、5.2±2.8％、2.1±0.3％。1％NaF血組外其余組分解符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)過(guò)程二室開(kāi)放模

9、型，可用Ct=Co-αt+Cle-βt表示。NaF血組分解符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)過(guò)程一室模型，可用Ct=Co-αt表示。20℃、4℃、-20℃、20℃(4％甲醛)保存肝臟中甲胺磷的快速分解半衰期(t1/2α)和慢速分解半衰期(t1/2β)分別為3.37天、9.46天、16.28天、1.38天和0天(無(wú))、354.72天、195281.20天、113.93天：20℃、4℃、-20℃、20℃(1％NaF)保存血液中甲胺磷的快速分解半衰期(t1/2α

10、)和慢速分解半衰期(t1/2β)分別是2.38天、14.42天、10.04天、0.68天和15.61天、476.9627天、206.78天(1％NaF無(wú))。根據(jù)Ct=Co-αt和Ct=Co-αt+Cle-βt方程計(jì)算的各樣本中甲胺磷含量理論值與實(shí)測(cè)值接近。
　　 3.埋葬尸體分解動(dòng)力學(xué)
　　 8倍LD50灌胃致死犬埋葬尸體中甲胺磷含量呈先上升后下降的趨勢(shì)。埋葬尸體心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、胃、心血中甲胺磷含量從埋葬時(shí)

11、(0天)的100％上升至29天的427.5％±154.7％～1270.9％±1136.2％，然后下降至88天和225天的10.5％±2.4％～86.7％±32.8％和1.1±0.6～6.4±2.6％；右前肢肌、右后肢肌、胸肌、腦中甲胺磷含量從埋葬時(shí)(0天)的100％上升至58天的254.6％±246.2％～304.2％±43.7％，然后下降至139天和225天的9.8％±3.8％～27.2±8.1和0～6.0％±2.3％。
　　

12、 不同埋葬方式研究結(jié)果顯示：埋葬75天塑料袋包裝犬尸體心臟、脾臟、肺臟、腎臟、腦、胸肌中甲胺磷含量顯著高于編織袋包裝犬，其脾臟、腎臟、腦中甲胺磷含量顯著高于木箱(棺材)包裝犬。
　　 不同季節(jié)埋葬結(jié)果顯示：3-6月埋葬犬尸體中心臟、胃組織、右后肢肌中甲胺磷含量顯著高于8-11月埋葬犬，而肝臟、肺臟、腎臟、右前肢肌、胸肌中甲胺磷含量無(wú)顯著性差異。3-6月埋葬犬尸體中甲胺磷含量3.74±0.84μg/ml，而8-11月埋葬犬尸體中均

13、未取到心血。
　　 結(jié)論：
　　 1.本實(shí)驗(yàn)采用8倍LD50劑量(犬)甲胺磷灌胃染毒，建立了甲胺磷的死后分布、保存檢材和埋葬尸體中的分解動(dòng)力學(xué)動(dòng)物(研究)模型，可應(yīng)用于甲胺磷中毒(死)的法醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)和法醫(yī)毒物動(dòng)力學(xué)研究。
　　 2.本研究建立了生物檢材中甲胺磷的提取和GC-FPD、GC/MS檢測(cè)方法，提取回收率、線性范圍、檢測(cè)靈敏度均達(dá)生物材中毒(藥)物檢驗(yàn)要求，可應(yīng)用于甲胺磷中毒(死)案件的法醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)和法醫(yī)毒物動(dòng)

14、力學(xué)研究。
　　 3.8 LD50染毒致死犬體內(nèi)甲胺磷含量從高到低依次為：胃＞脾、肝、腎、心血、肺、尿＞胸肌、右前肢、心、右后肢、腦＞膽汁、玻璃體液。甲胺磷中毒(死)埋葬尸體法醫(yī)學(xué)鑒定時(shí)，除血外，還可取胃、脾、肝、腎等毒物含量高的組織檢材進(jìn)行毒物分析，其死后分布含量關(guān)系還可用于極端條件下尸體血中甲胺磷含量的推斷。
　　 4.甲胺磷在保存犬血液和肝臟中可發(fā)生分解，含量呈下降趨勢(shì)。低溫保存可減緩甲胺磷的分解，使甲胺磷含量下降

15、減緩，分解半衰期延長(zhǎng)；但添加抑菌劑(NaF)或防腐劑(組織甲醛固定)均加速甲胺磷的分解。甲胺磷中毒(死)案件的法醫(yī)學(xué)鑒定中，檢材應(yīng)在7天內(nèi)及時(shí)送檢和檢測(cè)，若不能及時(shí)送檢，應(yīng)冷凍保存，盡快送檢，但不能添加抑菌劑(NaF)或防腐劑(甲醛)。
　　 5.甲胺磷在不同條件保存血和肝臟中分解符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)過(guò)程二室或一室開(kāi)放模型，可用Ct=Co-αt+Cle-βt或Ct=Co-αt表示。在甲胺磷中毒(死)案件法醫(yī)學(xué)鑒定時(shí)，可采用公式和分解動(dòng)

16、力學(xué)參數(shù)推斷取材當(dāng)時(shí)體內(nèi)甲胺磷濃度或送檢當(dāng)時(shí)檢材中甲胺磷含量，為甲胺磷中毒(死)案件法醫(yī)學(xué)鑒定提供科學(xué)依據(jù)。
　　 6.8倍LD50灌胃致死犬埋葬尸體中甲胺磷含量呈現(xiàn)上升后下降的趨勢(shì)，埋藏29或58天含量最高，埋葬225天，犬心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、腦、胃、右前肢肌、右后肢肌中仍可檢出甲胺磷(最高1.13±0.61μg/g)；埋葬方式對(duì)埋葬犬尸體內(nèi)甲胺磷分解有影響，編織袋內(nèi)埋葬分解較快，棺材次之、塑料袋最慢；埋葬季節(jié)埋葬犬