MicroRNA-155和SOCS1在銀屑病患者皮膚中的表達(dá)及作用機制.pdf

1、目的:
　　研究microRNA-155(miR-155)和SOCS1、STAT3基因在銀屑病患者皮損區(qū)及非皮損區(qū)皮膚中的表達(dá)差異及表達(dá)定位;探索調(diào)控小鼠皮膚miR-155表達(dá)對SOCS1、STAT3及相關(guān)炎性細(xì)胞因子表達(dá)的影響。
　　方法:
　　活檢切取12名尋常型銀屑病患者皮損及鄰近非皮損區(qū)的皮膚組織，石蠟包埋。RT-PCR方法檢測并對比12對標(biāo)本的皮損區(qū)和非皮損區(qū)中miR-155、STAT3、SOCS1基因的mR

2、NA水平表達(dá)水平;對組織切片中的目的microRNA進(jìn)行原位雜交，觀察miR-155在皮膚組織中的表達(dá)位置;用免疫組織化學(xué)方法對SOCS1蛋白和兩種磷酸化STAT3蛋白的表達(dá)進(jìn)行觀察、分析。建立小鼠銀屑病模型，通過miR-155激動劑、拮抗劑皮內(nèi)注射干預(yù)miR-155的表達(dá)，PCR及WB方法檢測干預(yù)對STAT、SOCS1及相關(guān)炎性細(xì)胞因子表達(dá)的影響。
　　結(jié)果:
　　MiR-155在皮損區(qū)的表達(dá)顯著高于非皮損區(qū)(P=0.00

3、05);在皮膚的表皮、真皮均有表達(dá)，定位在細(xì)胞核，基底層表達(dá)較高。銀屑病患者皮損區(qū)STAT3、SOCS1基因的mRNA表達(dá)水平明顯高于非皮損區(qū)(P=0.0002; P=0.0081);兩種磷酸化STAT3蛋白、SOCS1蛋白主要表達(dá)在角質(zhì)形成細(xì)胞的細(xì)胞核，蛋白在皮損區(qū)的表達(dá)水平均明顯高于非皮損區(qū)(P＜0.05)。與對照皮損區(qū)相比較，miR-155拮抗劑干預(yù)的小鼠模型銀屑病樣皮損內(nèi)SOCS1的蛋白表達(dá)水平顯著升高，而在mRNA表達(dá)水平無明

4、顯變化;STAT3基因mRNA表達(dá)水平、蛋白表達(dá)水平均降低;TNF-α、IL-23、IL-6 mRNA表達(dá)水平顯著降低，IL-17 mRNA表達(dá)水平顯示出了降低趨勢;miR-155激動劑干預(yù)后皮損未見SOCS1、STAT3、TNF-α、IL-23、IL-6、IL-17表達(dá)水平的變化。
　　結(jié)論:
　　MiR-155、STAT3及SOCS1基因在銀屑病皮損區(qū)較非皮損區(qū)中表達(dá)上調(diào)并主要定位在細(xì)胞核。拮抗miR-155表達(dá)可能通過