腫瘤壞死因子α致HUVEC內(nèi)皮型一氧化氮合酶降解的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：研究腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）是否可以通過細胞內(nèi)蛋白質(zhì)降解途徑引起的人臍靜脈內(nèi)皮細胞（human umbilical vein endothelial cell，HUVECs）內(nèi)皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase,eNOS）的蛋白量減少。
　　方法：建立原代HUVEC的培養(yǎng)條件，用CD31和Ⅷ因子免疫熒光法判斷細胞純度；選取

2、TNF-α不同濃度（0.01、0.1、1和10 ng/mL）、不同時間（24、48和72 h）處理 HUVECs；給予溶酶體抑制劑氯化氨（NH4Cl）、caspase抑制劑（caspase inhibitor）和泛素-蛋白酶體抑制劑（MG-132）預處理HUVECs1.5 h后加入TNF-α（1 ng/mL）共同處理細胞24 h,Western blot法檢測HUVECs中eNOS蛋白表達水平。
　　結果：HUVEC細胞純度符合實

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