褐多孔菌發(fā)酵物的化學(xué)成分及抑菌活性研究.pdf

1、褐多孔菌(Polyporus pecipes)是擔(dān)子菌綱、多孔菌目、多孔菌科真菌，一般寄生于多種倒木或腐朽木上，藥用抗癌，可治療乳腺癌、前列腺癌，而幼時(shí)可食用，具有提高免疫、軟化血管、預(yù)防和延緩心臟老化、調(diào)節(jié)大腦神經(jīng)、抗衰老的作用。由于真菌代謝產(chǎn)物具有多種結(jié)構(gòu)類型和生理活性，是尋找新的天然藥物的重要來源，為了開發(fā)利用我國的真菌資源，尋找新的活性成分，本文以微生物發(fā)酵學(xué)、植物化學(xué)和現(xiàn)代化學(xué)分離理論為基礎(chǔ)，在褐多孔菌發(fā)酵液及菌絲體提取物抑菌

2、活性跟蹤檢測(cè)的前提下，利用色譜技術(shù)和現(xiàn)代分離方法對(duì)其菌絲體乙酸乙酯提取物的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)的分離純化。研究結(jié)果如下： 采用濾紙片法測(cè)定發(fā)酵物各部分對(duì)細(xì)菌的抑制作用。濃度為40mg/mL時(shí)，發(fā)酵物乙酸乙酯部分對(duì)7種細(xì)菌均有不同程度的抑制作用，其中菌絲體乙酸乙酯部分對(duì)蠟狀芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌抑制效果十分顯著，對(duì)金黃色葡萄球菌和北京棒狀桿菌也有較好的抑制作用；發(fā)酵液乙酸乙酯部分對(duì)金黃色葡萄球菌和巨大芽孢桿菌抑制效果十分顯著，對(duì)枯草

3、芽孢桿菌、大腸桿菌和馬鈴薯芽孢桿菌抑制效果也很明顯，而發(fā)酵液及菌絲體的正丁醇部分對(duì)各種細(xì)菌的抑制作用均不明顯。 采用瓊脂稀釋法測(cè)定發(fā)酵物各部分對(duì)細(xì)菌的最小抑制濃度。菌絲體乙酸乙酯部分對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的最小抑制濃度(MIC)為2.50mg/mL，蠟狀芽孢桿菌為1.25mg/mL，枯草芽孢桿菌為0.625 mg/mL，發(fā)酵液乙酸乙酯部分對(duì)金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌最小抑制濃度為2.50mg/mL，巨大芽孢桿菌為1.25

4、mg/mL，菌絲體正丁醇部分對(duì)蠟狀芽孢桿菌最小抑制濃度為2.5mg/mL，發(fā)酵液正丁醇部分對(duì)金黃色葡萄球菌和蠟狀芽孢桿菌最小抑制濃度為2.50 mg/mL。 采用生長速率法測(cè)定發(fā)酵物各部分對(duì)病原菌的抑制作用。濃度為4mg/mL時(shí)，菌絲體乙酸乙酯部分對(duì)白菜黑斑病菌和小麥赤霉病菌抑菌率為100％，0.5 mg/mL時(shí)，對(duì)上述兩種病原菌的抑菌率分別為83.89％和76.93％；濃度為4 mg/mL時(shí)，發(fā)酵液乙酸乙酯部分對(duì)辣椒疫霉病菌、

5、黃瓜炭疽病菌、小麥赤霉病菌和棉花枯萎病菌抑菌率均為100％，0.5 mg/mL時(shí)，對(duì)小麥赤霉病菌的抑菌率仍為100％；發(fā)酵物正丁醇部分在濃度為4 mg/mL時(shí)對(duì)所有病原菌抑制效果均很顯著， 0.5 mg/mL時(shí)，菌絲體正丁醇部分對(duì)黃瓜炭疽病菌、小麥赤霉病菌和棉花枯萎病菌的抑菌率高于70％，發(fā)酵液正丁醇部分對(duì)白菜黑斑病菌和棉花枯萎病菌抑制效果顯著。從褐多孔菌菌絲體的乙酸乙酯提取物中分離得到五個(gè)單體化合物，綜合應(yīng)用GC—MS、EI—MS、<

6、'1>HNMR、<'13>CNMR、DEPT及(-)ESI-MS等現(xiàn)代波譜學(xué)方法和技術(shù)，并與標(biāo)準(zhǔn)品、文獻(xiàn)值以及圖譜庫對(duì)照，鑒定出其中的三個(gè)，化合物Ⅰ麥角甾醇過氧化物，化合物Ⅳ為1-(2，4-dihydroxy-5-methylphenyl)ethanpone，化合物Ⅴ為4，6，8(14)，22(23)-四烯-3-酮-麥角甾烷，這三種化合物均為首次從褐多孔菌中發(fā)現(xiàn)，其中1-(2，4-dihydroxy-5-methylphenyl)eth