陽離子聚合物的合成及胍基化修飾對基因轉(zhuǎn)染性能的影響.pdf

1、胍基基團具有很好的細胞膜穿透能力，將其連接到陽離子聚合物上能夠幫助聚合物進入細胞，并且能分散聚合物上伯胺的正電荷，降低其毒性，從而提高聚合物的基因轉(zhuǎn)染效率。本文設(shè)計合成了一種新型胍基化試劑，用它來修飾三個系列的聚合物，以期提高它們的轉(zhuǎn)染效率。
　　 聚乙烯亞胺(PEI)是目前最有效的陽離子非病毒基因載體之一，PEI的轉(zhuǎn)染效率隨著其分子量的增加而增加，但是高分子量同樣會導(dǎo)致高毒性。本文采用胍基化試劑修飾不同分子量的PEI，探索胍基

2、修飾度以及胍基基團與PEI的連接臂長對轉(zhuǎn)染效率的影響。其次合成了一種多羥基的交聯(lián)劑，用其交聯(lián)小胺類單體及低分子量的PEI，并用胍基化試劑對制備出來的聚合物進行修飾，以探討引入羥基和胍基對聚合物的水溶性，毒性及轉(zhuǎn)染性能的影響。此外，聚β氨酯也是一類非常有效的陽離子非病毒載體，本文通過1,4-丁二醇雙丙烯酸酯與5-氨基戊醇的交聯(lián)制得聚β氨酯，用氨基封端，并用所合成的胍基化試劑修飾，探討胍基修飾前后聚β氨酯的轉(zhuǎn)染性能的變化。
　　 對

3、這些聚合物進行水溶性評價，然后以B16F10細胞為受體，增強綠色熒光蛋白質(zhì)粒(EGFP)為報告基因進行細胞轉(zhuǎn)染性能實驗，篩選出幾種轉(zhuǎn)染效果較好的聚合物，其中經(jīng)胍基化修飾后的2700Da PEI(P10)對B16F10細胞的轉(zhuǎn)染效率達到了82％，與未修飾前相比，提高了近8倍。細胞毒性實驗結(jié)果表明，經(jīng)胍基修飾后的聚合物毒性明顯降低。粒徑實驗結(jié)果顯示，P10/DNA復(fù)合物的直徑為141～197nm。以上結(jié)果表明，在聚合物中引入胍基基團有利于轉(zhuǎn)