擬南芥磷脂酶C調(diào)節(jié)花粉萌發(fā)和生長的功能研究.pdf

1、肌醇磷脂依賴的磷脂酶C(PI-PLC，簡稱PLC)是肌醇磷脂信號系統(tǒng)中的一個關(guān)鍵酶，它水解PIP<,2>(Phosphatidylinositol bisphosphate)生成兩個第二信使分子，1，4，5-三磷酸肌醇(IP<,3>)和二酰甘油(DAG)，通過這兩個信使分子調(diào)節(jié)一系列蛋白的活性，如酶、受體、轉(zhuǎn)運蛋白、細(xì)胞骨架成分等，從而在細(xì)胞的生長、增殖、代謝、分泌和收縮的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中起作用。研究表明，植物PLC基因在植物對外界刺激如滲透

2、、脅迫、ABA、光、重力、病原侵染、授粉以及缺氧等的應(yīng)答和生理過程中起作用。擬南芥基因組測序工作完成后，序列信息表明擬南芥中可能存在14種不同的PLC和類PLC亞型的基因。研究不同PLC亞型參與調(diào)節(jié)的生理過程，可以為PLc的功能研究和作用機制的探討提供重要的依據(jù)。 本試驗以來自salk庫中的擬南芥PLC一個亞型的基因(AtPLC14)缺失突變體為材料，以野生型擬南芥為對照，檢測到了突變體中花粉萌發(fā)過程和果實成熟過程生理表型的變化

3、，為該PLC亞型參與花粉萌發(fā)和生長的過程提供了分子水平的invivo證據(jù)。 首先用PCR的方法篩選鑒定了來自salk庫的擬南芥AtPLC14的T-DNA插入突變純合體，并通過RT-PCR檢查證實該突變體AtPLC14基因表達(dá)缺失；以野生型擬南芥(Columbia生態(tài)型)做對照，檢測了突變體花粉的表型和萌發(fā)特征，發(fā)現(xiàn)AtPLC14的缺失突變體花粉活力下降，其萌發(fā)率比野生型下降了約30％，花粉管生長速度延遲約8小時，并且長角果成熟延