一株中度嗜鹽菌JLT-09的生物學特性初步研究.pdf

1、學校代碼：—102—00分類號：Q墮研究生學號：密級：玉⑨東牡知予冠大堇碩士學位論文一株中度嗜鹽菌JLT_09的生物掌特性初步研究StudyonBiologicalcharacteristicsofmoderatelyhalophilicbacteriaofJLrr_09指導教師學科專業(yè)研究方向?qū)W位類型作者：張艷艷劉東波副教授微生物學極端微生物學學歷碩士東北師范大學學位評定委員會2011年5月摘要從中國內(nèi)蒙古吉蘭泰鹽湖的湖水樣品中得到一

2、株產(chǎn)堿性蛋白酶的嗜鹽菌(最適生長鹽濃度為8％一10％左右)，在此基礎上對它進行了傳統(tǒng)表型特征研究，包括形態(tài)學觀察及生理生化特征的研究，此外，還對其進行了16SrDNA序列分析，結(jié)合以上研究初步鑒定該菌是喜鹽芽孢桿菌屬的一個新菌株，并且為中度嗜鹽菌，命名為HalobacillusspJLT09。表型分析顯示該菌株呈桿狀，革蘭氏陰性，有芽孢，無莢膜，無鞭毛，菌落呈現(xiàn)乳白色表面光滑濕潤，菌落邊緣不是很規(guī)則圓滑。最適生長鹽濃度是8％10％，最適

3、生長Mg濃度是3％，最適生長pH是8，最適生長溫度是30℃35℃。能利用山梨醇、蔗糖、甘露醇為唯一碳源生長，但是不能利用葡萄糖、麥芽糖、木糖、淀粉、乳糖、半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖，果糖為唯一碳源。MR實驗和VP實驗測定為陰性，檸檬酸鹽利用實驗測定為陰性，硝酸鹽和亞硝酸鹽還原反應為陰性，不產(chǎn)H2S，該菌株不具有淀粉酶、脲酶、酯酶活性，但過氧化氫酶反應為陽性，能產(chǎn)生蛋白酶。對此菌株產(chǎn)蛋白酶的發(fā)酵條件進行優(yōu)化，結(jié)果表明，在以干酪素為碳

4、源和氮源的情況下，當培養(yǎng)基的初始pH為8，培養(yǎng)溫度為30℃，接種量為O5％，培養(yǎng)時間24小時時，培養(yǎng)基的產(chǎn)酶條件最佳。對該菌發(fā)酵液進行低溫離心、抽濾、超濾、凍干，得到粗酶液，對該粗酶液的性質(zhì)進行研究，結(jié)果表明：酶的最適反應溫度為60攝氏度，此酶的熱穩(wěn)定性不好，當溫度高于60攝氏度時，酶活基本喪失。該酶在pH為810的范圍內(nèi)酶活最高，在DH為610之間相對酶活較高，但低于6或者高于11時相對酶活下降較多，因此該酶有一定的耐堿性質(zhì)，屬堿性蛋