硅酸鹽細菌胞外多糖及其發(fā)酵條件的初步研究.pdf

1、多糖是一類由廣泛存在于自然界的生物體產(chǎn)生的獨特的生物大分子。它們具有各種各樣特殊的且在大多數(shù)情況下相當(dāng)復(fù)雜的化學(xué)結(jié)構(gòu)，不同的生理功能和廣泛的(潛在的)應(yīng)用價值。本論文對硅酸鹽細菌的胞外多糖進行了分離純化，并初步研究了其糖基組成。使用紫外線對硅酸鹽細菌進行誘變處理，利用平板初篩，搖瓶復(fù)篩，最終獲得胞外多糖高產(chǎn)菌株UV-23。對其搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基和搖瓶發(fā)酵條件進行了優(yōu)化，提高了硅酸鹽細菌胞外多糖的產(chǎn)量。 硅酸鹽細菌經(jīng)過搖瓶培養(yǎng)后，采用

2、堿提醇沉法得到粗多糖，粗多糖經(jīng)紫外光譜分析不含核酸和蛋白質(zhì)，再經(jīng)DEAE-纖維素離子交換柱層析純化得到純多糖，采用SephadexG-100凝膠柱層析和醋酸纖維薄膜電泳對純多糖進行純度檢驗，結(jié)果表明純多糖為單一組分，然后采用化學(xué)法對純多糖的糖基組成進行分析，結(jié)果表明硅酸鹽細菌胞外多糖含有糖醛酸，不含有氨基己糖和硫酸取代基。 利用孢子熱處理法對硅酸鹽細菌進行純化，選擇多糖發(fā)酵性能較好的7號菌株作為誘變出發(fā)菌株，搖瓶多糖產(chǎn)量為0.5

3、1g/L。然后對出發(fā)菌株進行紫外線誘變處理，經(jīng)過平板初篩和搖瓶復(fù)篩，最終獲得多糖高產(chǎn)菌株UV-23，產(chǎn)量達到0.59g/L，是出發(fā)菌株的1.16倍。 通過單因素試驗和均勻設(shè)計優(yōu)化，確定UV-23菌株的最佳發(fā)酵培養(yǎng)基配方為：蔗糖1％、硫酸銨0.3％、KCl0.06％、Na2HPO40.1％、MgSO4·7H2O0.09％、酵母膏0.08％、CaCO30.33％，按優(yōu)化后的培養(yǎng)基進行搖瓶發(fā)酵試驗，多糖產(chǎn)量為2.25g/L。