老年2型糖尿病認知功能障礙常見中醫(yī)證型的研究及健脾補腎方對2型糖尿病小鼠腦組織癡呆相關的炎癥因子和鐵代謝的影響.pdf

1、本文主要從以下幾個部分展開論述：
　　第一部分 老年2型糖尿病認知功能障礙常見中醫(yī)證型的研究
　　目的:通過對老年2型糖尿病認知功能障礙脾腎虧虛證、痰瘀阻絡證證型患者癡呆相關因素的分析研究，探討脾腎虧虛、痰瘀互阻在老年2型糖尿病認知功能障礙發(fā)病中的影響。
　　方法:搜集2013年12月至2014年12月南京市鼓樓醫(yī)院老年科60歲以上住院患者，參照糖尿病及認知障礙診斷標準將所有患者分為2型糖尿病癡呆組66人和非糖尿病癡呆

2、組（以下簡稱癡呆組）43人。參照中醫(yī)藥高校統(tǒng)編教材《中醫(yī)內(nèi)科學（新二版）》及《中藥新藥臨床研究指導原則（2002版）》將糖尿病癡呆組按中醫(yī)辯證標準分為脾腎虧虛證組、痰瘀阻絡證組、肝腎陰虛證組。其中脾腎虧虛證34例、痰瘀阻絡證30例、肝腎陰虛證組2例。觀察項目:一般情況（性別、年齡、身高、體重、BMI、血壓、血脂、肝腎功能）;糖尿病相關指標(糖化血紅蛋白HbA1C、空腹血糖FBG、空腹胰島素FINS、空腹C肽、餐后C肽、HOMA-IR);

3、炎性指標(IL-6、IL-1β、CRP、NSE);血清同型半胱氨酸HCY、血清葉酸、葉酸基因;神經(jīng)心理量表評估（包括:MMSE、MoCA、ADL、HIS、HAMD）:海馬磁共振指標(海馬高度、脈絡膜裂大小、NAA/Cr、MI/Cr)。
　　結(jié)果:1、糖尿病癡呆組及各亞型組（脾腎兩虛證組與痰瘀阻絡證組）與癡呆組比較
　　1)一般情況比較:糖尿病癡呆組體重、BMI、腹圍比癡呆組偏高，有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。兩組間年齡、性別

4、、身高、血壓、血脂、肝腎功能比較，無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。脾腎虧虛證組、痰瘀阻絡證組腹圍、體重、BMI均高于癡呆組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。脾腎虧虛證組、痰瘀阻絡證組與癡呆組比較，年齡、性別、身高、血壓、血脂、肝腎功能差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　2)糖尿病相關指標比較:糖尿病癡呆組的HbA1C、FBG、C肽-120min、FINS、HOMA-IR水平均高于癡呆組，存在統(tǒng)計學差異(P＜0.05);C肽-0

5、min水平低于癡呆組，有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。脾腎虧虛證組、痰瘀阻絡證組HbA1C、FBG、C肽-120min、FINS、HOMA-IR均高于癡呆組，C肽-0min、C肽-120min均低于癡呆組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　3)炎癥因子比較:糖尿病癡呆組IL-1β、IL-6均高于癡呆組，有統(tǒng)計學差異(P＜0.05);兩組CRP、NSE水平無明顯差異(P＞0.05)。脾腎虧虛證組、痰瘀阻絡證組IL-6、IL-1β

6、水平均高于癡呆組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。脾腎虧虛證組、痰瘀阻絡證組與癡呆組比較，CRP、NSE差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　4) HCY、葉酸、葉酸基因比較:糖尿病癡呆組的HCY高于癡呆組，血清葉酸水平低于對照組，有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。脾腎虧虛證組、痰瘀阻絡證組HCY均高于癡呆組，葉酸水平均低于癡呆組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。各組間葉酸基因分布不同，有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。
　　

7、5)神經(jīng)心理量表評估比較:糖尿病癡呆組患者MOCA評分低于癡呆組，HIS評分高于癡呆組，有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。脾腎虧虛證組、痰瘀阻絡證組MOCA評分均低于癡呆組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。脾腎虧虛證組、痰瘀阻絡證組MMSE、ADL、HIS、HAMD評分與癡呆組比較，無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。
　　6)海馬磁共振結(jié)果比較:糖尿病癡呆組患者海馬高度、NAA/Cr低于癡呆組，脈絡膜裂大學、MI/Cr大于癡呆組，有統(tǒng)計

8、學差異(P＜0.05)。脾腎虧虛證組、痰瘀阻絡證組海馬高度、左側(cè)NAA/Cr水平低于癡呆組，脈絡膜裂大小、左側(cè)海馬MI/Cr均高于癡呆組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);右側(cè)海馬NAA/Cr、MI/Cr與癡呆組比較無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。
　　2、脾腎兩虛證組與痰瘀阻絡證組比較
　　1)一般情況比較:兩組間年齡、性別、身高、體重、BMI、腹圍、血壓、血脂、肝腎功能無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。
　　2)糖尿病相

9、關指標比較:脾腎虧虛組的HbA1C、FBG、FINS、HOMA-IR均高于痰瘀阻絡證組，C肽-0min、C肽-120rmin水平均低于痰瘀阻絡證組，有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。
　　3)炎癥因子比較:脾腎虧虛證組血清IL-6水平高于痰瘀阻絡證組，有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。兩組間CRP、NSE、IL-1β比較無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。
　　4) HCY、葉酸、葉酸基因比較:脾腎虧虛證組HCY高于痰瘀阻絡證組，葉酸水平

10、低于痰瘀阻絡證組，有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。兩組間葉酸基因分布不同，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　5)神經(jīng)心理量表評估比較:脾腎虧虛證組MOCA評分低于痰瘀阻絡證組，有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。兩組間MMSE、ADL、HIS、HAMD評分比較無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。
　　6)海馬功能磁共振結(jié)果比較:脾腎虧虛證組海馬高度、左側(cè)NAA/Cr均低于痰瘀阻絡證組，脈絡膜裂大小、左側(cè)MI/Cr水平均高于痰瘀阻絡證

11、組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:1、老年2型糖尿病癡呆患者中脾腎虧虛型最多見，其次為痰瘀阻絡型，肝腎陰虛者較少見。
　　2、老年2型糖尿病癡呆組、脾腎虧虛證組、痰瘀阻絡證組患者較癡呆組患者認知功能明顯下降，且脾腎虧虛證組患者認知功能下降最明顯，提示脾腎與認知功能障礙的關系更為密切。
　　3、腹型肥胖、慢性高血糖、胰島素抵抗、炎癥反應、高同型半胱氨酸血癥、海馬體積萎縮、神經(jīng)元退變(NAA/Cr降低)、膠

12、質(zhì)細胞增生（MI/Cr升高）與脾腎虧虛型和痰瘀阻絡型老年2型糖尿病患者認知功能障礙發(fā)生有關，也可能是脾腎虧虛型老年2型糖尿病癡呆患者認知功能下降最明顯的原因。
　　4、左側(cè)海馬體積萎縮及代謝在脾腎虧虛組中的變化較痰瘀阻絡組更明顯，提示左側(cè)海馬可能與脾腎關系最密切。
　　第二部分 健脾補腎方對2型糖尿病小鼠腦組織中癡呆相關的炎癥因子和鐵代謝的影響
　　目的:1、成功建立2型糖尿病小鼠模型及觀察小鼠腦組織中癡呆相關炎癥因子

13、及鐵代謝基因的表達。
　　2、觀察中醫(yī)健脾補腎方對于上述癡呆相關因子的影響，探討健脾補腎方治療認知功能障礙的可能作用靶點。
　　方法:健康清潔級12周齡雄性C57BL/6小鼠30只，適應性喂養(yǎng)一周后，將小鼠隨機分成造模組25只和對照組5只，對照組以普通飼料喂養(yǎng)，造模組以高脂飼料喂養(yǎng)4周后，禁食12h，行腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)30mg/kg/d*1天，1天后測小鼠隨機血糖，未達標者追加一次STZ。隨機測量小鼠隨機血糖三次

14、，大于16.7mmol/1的19只老鼠認為造模成功（血糖未達標及死亡者共6只）。造模成功組再隨機分兩組:糖尿病組和中藥健脾補腎組。中藥健脾補腎組以7.4g/kg·d灌胃，糖尿病組及正常對照組在相同時間灌服相同容積生理鹽水，療程8周，治療結(jié)束取3只小鼠腦組織做病理切片，余小鼠腦組織分大腦、小腦、腦干、海馬四部分，用RT-PCR手段檢測各組織中癡呆相關炎癥因子(IL-6 IL-1βTNF-α)及鐵代謝相關基因(DMT1、FPN1、Hepci

15、din、CP)水平。
　　結(jié)果:1、糖尿病組和健脾補腎組小鼠三次隨機血糖均＞16.7mmol/1;對照組小鼠血糖水平在正常范圍。
　　2、健脾補腎組小鼠治療4周后血糖較糖尿病組有所下降，但無明顯統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。
　　3、病理切片:糖尿病組及健脾補腎組均可見腦組織中神經(jīng)元丟失、退變及膠質(zhì)細胞增生。但健脾補腎組較糖尿病組有明顯改善。
　　4、糖尿病組小鼠腦組織中炎癥因子IL-6、IL-1β、TNF-α水平

16、較對照組升高，且有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。
　　5、健脾補腎組大腦、小腦、海馬組織中炎癥因子IL-6、IL-1β、TNF-α表達水平下降，且與糖尿病組有顯著統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。
　　6、健脾補腎組腦干組織中炎癥因子IL-1β、TNF-α表達水平下降，且與糖尿病組有顯著統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。但IL-6水平無明顯差異。
　　7、糖尿病組小鼠腦組織中Fe代謝相關基因DMT1水平較對照組升高，F(xiàn)PN1、CP水

17、平較對照組下降，且均有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。
　　8、健脾補腎組小鼠腦鐵代謝相關基因水平較糖尿病組有所下降，有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。
　　結(jié)論:1、造模組（糖尿病組+健脾補腎組）三次隨機血糖均＞16.7mmol/l，造模成功。
　　2、神經(jīng)元退變及膠質(zhì)細胞增生是癡呆發(fā)生的病理基礎，而本實驗中糖尿病小鼠腦組織中神經(jīng)元退變及膠質(zhì)細胞增生明顯，這為糖尿病導致癡呆學說提供了依據(jù)。
　　3、糖尿病小鼠腦組織中與