Il-23R表達型細胞在結(jié)直腸癌中的作用及結(jié)直腸癌同時性肝轉(zhuǎn)移外科治療策略探討.pdf

1、本文主要從以下幾個方面進行論述：
　　第一部分 結(jié)直腸癌(colorectal cancer，CRC)是世界范圍內(nèi)最常見的惡性腫瘤之一，在我國大中城市結(jié)直腸癌發(fā)病率已經(jīng)上升到第二位。炎性腸病(inflammatory boweldisease，IBD)已明確是結(jié)直腸癌的重要病因之一，在結(jié)直腸癌發(fā)病中扮演了極為重要的角色。大量基礎(chǔ)、臨床和流行病學的研究已經(jīng)證實，炎癥是一個明確可以導致腫瘤的危險因素。IBD的癌變機制主要與炎癥因子有關(guān)

2、。研究顯示，多種炎癥因子，如TNF-α、IL-31、IL45、IL-23等通過NF-κB及相關(guān)信號網(wǎng)絡(luò)通路在IBD的炎癥發(fā)生及癌變過程中發(fā)揮重要作用。
　　IL-23(白介素-23)是由兩個亞基組成的異源二聚體細胞因子，其中一個亞基為p40，與IL-12共用，另外一個獨有的亞基為p19。IL-23受體(IL-23R)也由兩個亞基組成，分別為和IL-12受體共用的IL-12Rβ1和新近發(fā)現(xiàn)的IL-23R。IL-23在自身免疫性疾病、

3、慢性炎癥和腫瘤中發(fā)揮重要作用。近年來，IL-23在炎癥性腸病及炎癥相關(guān)結(jié)直腸癌中的作用受到廣泛關(guān)注，成為研究的熱點。
　　目的：IL-23需要與其受體結(jié)合而發(fā)揮作用，由于IL-23R可表達于多種類型的細胞，究竟IL-23通過何種IL-23R表達型細胞促進結(jié)直腸炎相關(guān)結(jié)直腸癌的進展目前尚不明確。因此，本研究旨在探討IL-23促進結(jié)直腸炎相關(guān)結(jié)直腸癌進展的機制。
　　方法：我們首先構(gòu)建了IL-23R條件性敲除小鼠，分別是髓系細胞

4、特異性敲除IL-23R小鼠和T淋巴細胞特異性敲除IL-23R小鼠。通過骨髓轉(zhuǎn)輸?shù)姆绞?，利用小鼠氧化偶氮甲?azoxymethane，AOM)/葡聚糖硫酸鈉(dextran sodium sulfate，DSS)模型觀察和比較轉(zhuǎn)輸正常小鼠骨髓細胞組（WT BM組）、轉(zhuǎn)輸T淋巴細胞特異性敲除IL-23R小鼠骨髓細胞組（Lck-IL-23R-/-BM組）和轉(zhuǎn)輸髓系細胞特異性敲除IL-23R小鼠骨髓細胞組（Lyz-IL-23R-/-BM組）小

5、鼠腸道腫瘤生長情況，明確IL-23主要通過何種類型的細胞發(fā)揮促進腸道腫瘤進展的作用。隨后，通過流式細胞術(shù)對腸道浸潤的免疫細胞的分析進一步探討IL-23促進腫瘤進展的機制。
　　結(jié)果：腹腔注射AOM17周后處死小鼠，結(jié)果發(fā)現(xiàn):WT BM組小鼠腫瘤發(fā)生率最高為57.1％，Lck-IL-23R-/-BM組小鼠腫瘤發(fā)生率為50％，Lyz-IL-23R-/-BM組小鼠腫瘤發(fā)生率最低為22.2％。Lyz-IL-23R-/-BM和Lck-IL-

6、23R-/-BM組小鼠的腫瘤數(shù)量和大小較WT BM對照組均有減少，但是無統(tǒng)計學差別。腸道重量的比較顯示敲除髓系細胞IL-23R和T細胞IL-23R后小鼠腸道的重量均明顯減輕(P=0.0014，P=0.0318)。
　　對腸系膜淋巴結(jié)細胞的分析發(fā)現(xiàn):敲除IL-23R后，無論是T淋巴細胞特異性敲除的小鼠（Lck-IL-23R-/-BM）還是髓源性細胞特異性敲除的小鼠（Lyz-IL-23R-/-BM），Th17細胞的百分比與對照組(WT

7、 BM)小鼠相比降低2-3倍，而T淋巴細胞特異性敲除IL-23R的小鼠(Lck-IL-23R-/-BM) CD4+IFNγ+T細胞和CD8+IFNγ+T細胞的百分比均有輕微增加。腸道上皮內(nèi)免疫細胞分析結(jié)果顯示上皮內(nèi)幾乎沒有檢測到浸潤的Th17細胞，髓源性細胞特異性敲除IL-23R的小鼠中（Lyz-IL-23R-/-BM）腸道浸潤的CD4+IFNγ+T細胞顯著增加（占CD4+細胞13.4％），而T淋巴細胞特異性敲除IL-23R的小鼠（Lc

8、k-IL-23R-/-BM）CD4+IFNγ+ T淋巴細胞百分比則與對照組相似（占CD4+細胞5.29％）。CD4+IFNγ+ T細胞能夠產(chǎn)生和分泌IFNγ，輔助CD8+T淋巴細胞的免疫應(yīng)答，在抗腫瘤免疫中發(fā)揮著重要作用。
　　此外，我們還發(fā)現(xiàn)敲除IL-23R后，腸道中浸潤的CD11b+Gr1+MDSC（Myeloid-derived suppressor cells，骨髓源性抑制細胞）細胞百分比由對照組的9.33％分別降至1.1

9、8％（Lyz-IL-23R-/-BM）和0.69％(Lck-IL-23R-/-BM)。
　　結(jié)論：敲除IL-23R能夠一定程度上延緩腸道腫瘤的進展。除了通過Th17細胞，IL-23可能還通過與髓系細胞表達的IL-23R結(jié)合，抑制Th1細胞和促進MDSC細胞的產(chǎn)生促進結(jié)直腸炎相關(guān)結(jié)直腸癌的進展。
　　第二部分 結(jié)直腸癌患者在確診的時候常常是晚期，大約有13％-25％的結(jié)直腸癌患者確診的時候同時合并肝轉(zhuǎn)移，這也是預(yù)后不佳因素之一

10、。手術(shù)是唯一可能治愈結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的手段。以往，外科專家采用分期切除的手術(shù)方式對結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移患者施行治療。現(xiàn)今，同期切除的手術(shù)方式已經(jīng)被普遍采用。然而同期手術(shù)治療同時性結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的安全性和生存獲益目前還沒有定論。
　　目的：通過回顧性分析我們中心同時性結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移患者的臨床資料，探討同期與分期手術(shù)的安全性及不同手術(shù)方式對預(yù)后的影響。
　　方法：我們收集了2009年1月至2013年9月在我院診斷為同時性結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的

11、患者病例資料并進行隨訪。按手術(shù)方式分為同期手術(shù)組和分期手術(shù)組，比較兩組患者的一般情況、腫瘤情況、手術(shù)情況、術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生情況及術(shù)后住院時間。通過Log-rank檢驗和Cox比例風險回歸模型分別進行總生存和無病生存的單因素和多因素分析，了解影響患者預(yù)后的風險因素，明確兩種手術(shù)方式對患者生存的影響。
　　結(jié)果：最終有連續(xù)的73例接受治愈性手術(shù)治療的同時性結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移患者納入研究，其中同期手術(shù)的患者有60例(82.2％)，分期手術(shù)的患

12、者有13例(17.8％)。手術(shù)死亡率為0。分期手術(shù)組的術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生率高于同期手術(shù)組(46％ vs.23％)，但沒有統(tǒng)計學差異(P=0.166)。同期手術(shù)組的手術(shù)時間(240分鐘vs.420分鐘，P＜0.05)和術(shù)后住院時間(11天vs.18天，P＜0.05)要低于分期手術(shù)組。同期手術(shù)組患者的1，2，3年生存率分別為77％，59％和53％;分期手術(shù)組的分別為67％，42％和10％。同期手術(shù)組患者的5年生存率為23％。兩組間的總生存時間(