趨化因子MCP-1對(duì)大鼠海馬區(qū)NMDA受體介導(dǎo)的興奮性突觸后電流的作用及機(jī)制.pdf

1、目的:研究趨化因子MCP-1對(duì)大鼠海馬CA1區(qū)NMDA受體尤其是其重要亞型NR2B受體介導(dǎo)的興奮性突觸后電流的作用及機(jī)制。
　　方法:（一）采用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)，記錄2.3 nM MCP-1對(duì)大鼠海馬腦片CA1區(qū)NMDA受體及以NR2B為主要受體亞型介導(dǎo)的興奮性突觸后電流的影響，觀察MCP-1是否對(duì)海馬CA1區(qū)神經(jīng)元有易化興奮性作用;記錄MCP-1對(duì)自發(fā)興奮性突觸后電流(sEPSCs)的影響，探討MCP-1對(duì)大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元

2、和興奮性突觸傳遞功能的影響;（二）并應(yīng)用微管相關(guān)蛋白-2(MAP-2)抗體染色的方法觀察海馬CA1區(qū)神經(jīng)元樹突結(jié)構(gòu)的完整性，以研究在NMDA受體、AMPA受體、CCR2受體拮抗劑分別存在的情況下，MCP-1引發(fā)海馬腦片神經(jīng)元結(jié)構(gòu)損害的差異，觀察上述各種拮抗劑是否對(duì)MCP-1導(dǎo)致的神經(jīng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)損害有保護(hù)作用。
　　結(jié)果:(1)灌流液內(nèi)加入MCP-1(2.3 nM)能顯著增加大鼠海馬CA1區(qū)EPSCs、EPSCAMPAR、EPSCMD

3、AR的電流幅度(p＜0.05);(2) MCP-1能增加EPSCNR2BR的電流幅度，沖洗掉MCP-1后上述電流可恢復(fù)到接近給藥前基礎(chǔ)值，且此電流可被NR2B受體拮抗劑ifenprodil阻斷，證實(shí)為NR2B受體介導(dǎo)電流，說(shuō)明MCP-1對(duì)EPSCNR2BR的易化和促進(jìn)作用是可逆的;(3)量子分析發(fā)現(xiàn)，MCP-1增加sEPSCs的發(fā)生頻率但不影響其幅度的改變;(4)在海馬腦片上所做的MAP-2免疫組化染色的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示MCP-1對(duì)神經(jīng)元軸

4、突結(jié)構(gòu)有損害作用，該作用可被NMDA和AMPA受體拮抗劑或CCR2受體拮抗劑逆轉(zhuǎn)。
　　結(jié)論:MCP-1對(duì)大腦海馬CA1區(qū)NMDA受體尤其是NR2B受體介導(dǎo)的突觸后神經(jīng)元的興奮性有顯著易化作用，通過(guò)突觸前機(jī)制來(lái)提高神經(jīng)元的興奮性突觸傳遞，神經(jīng)元過(guò)度興奮引發(fā)興奮性神經(jīng)毒性而導(dǎo)致神經(jīng)損傷。NMDA、AMPA受體拮抗劑或CCR2受體拮抗劑對(duì)MCP-1誘導(dǎo)的神經(jīng)元軸突結(jié)構(gòu)損傷起到顯著保護(hù)作用，這些拮抗劑的神經(jīng)保護(hù)效應(yīng)可為尋找艾滋性認(rèn)知功能