發(fā)酵樺褐孔菌對(duì)肝癌Hepg-2細(xì)胞凋亡作用初探.pdf

1、目的：初步探討發(fā)酵樺褐孔菌對(duì)肝癌HepG-2細(xì)胞的凋亡作用。
　　方法：分別采用硫酸苯酚法、Folin-Ciocalteu法、比色法測(cè)定未發(fā)酵、發(fā)酵樺褐孔多糖、萜類(lèi)和多酚的含量;以肝癌HepG-2細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，采用MTT法測(cè)定發(fā)酵樺褐孔菌對(duì)肝癌HepG-2細(xì)胞增殖的影響;HE染色法觀察發(fā)酵樺褐孔菌對(duì)肝癌HepG-2細(xì)胞形態(tài)學(xué)的影響;流式細(xì)胞儀測(cè)定發(fā)酵樺褐孔菌對(duì)肝癌HepG-2細(xì)胞凋亡作用及細(xì)胞周期的影響;瓊脂糖凝膠電泳法觀察發(fā)酵

2、樺褐孔菌對(duì)肝癌HepG-2細(xì)胞DNA裂解的影響。
　　結(jié)果：與未發(fā)酵樺褐孔菌比較，發(fā)酵樺褐孔菌多糖、多酚和萜類(lèi)含量明顯升高(P＜0.01);發(fā)酵樺褐孔菌顯著抑制肝癌HepG-2細(xì)胞增殖，其抑制作用與給藥時(shí)間和給藥濃度呈正相關(guān)，且與未發(fā)酵樺褐孔菌相比，發(fā)酵樺褐孔菌濃度為100mg/L，處理時(shí)間為48h對(duì)肝癌細(xì)胞的抑制作用更明顯(P＜0.05)，且呈時(shí)間與劑量依賴(lài)性;與對(duì)照組比較，發(fā)酵樺褐孔菌組肝癌HepG-2細(xì)胞細(xì)胞間距增大、細(xì)胞核

3、固縮、染色加深、細(xì)胞膜皺縮、形成凋亡小體，出現(xiàn)典型凋亡形態(tài)，凋亡程度隨著劑量和時(shí)間的增加而增強(qiáng)，與未發(fā)酵組相比，肉眼觀察無(wú)差異;發(fā)酵樺褐孔菌可顯著誘導(dǎo)肝癌HepG-2細(xì)胞凋亡，并且隨著濃度的增加其誘導(dǎo)凋亡作用增強(qiáng)，與未發(fā)酵樺褐孔菌相比，當(dāng)發(fā)酵樺褐孔菌濃度為200mg/L、400mg/L，誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡作用更顯著(P＜0.01);與對(duì)照組相比，發(fā)酵樺褐孔菌組肝癌HepG-2細(xì)胞細(xì)胞周期分布受到影響， G0/G1期細(xì)胞比率顯著升高(P＜0

4、.05)，S期和G2/M期比率顯著下降(P＜0.05)，與未發(fā)酵樺褐孔菌組相比，發(fā)酵樺褐孔菌濃度為200mg/L，作用時(shí)間為48h時(shí)G0/G1期細(xì)胞周期分布存在顯著性差異(P＜0.05);與對(duì)照組相比，發(fā)酵樺褐孔菌作用48h肝癌HepG-2細(xì)胞DNA均發(fā)生裂解，呈現(xiàn)典型的梯形凋亡形態(tài)，與未發(fā)酵樺褐孔菌相比，發(fā)酵樺褐孔菌DNA裂解更明顯。
　　結(jié)論：發(fā)酵樺褐孔菌可顯著誘導(dǎo)肝癌HepG-2細(xì)胞凋亡，且與未發(fā)酵樺褐孔菌相比，發(fā)酵樺褐孔菌