環(huán)境雌激素壬基酚對雄鼠結腸黏膜雌激素受體β表達影響的研究.pdf

1、目的：擬通過動物實驗研究壬基酚的擬雌激素樣作用是否對雄鼠結腸黏膜雌激素受體β表達有影響。
　　方法：1、實驗分組：選用清潔級S D健康雄性大鼠60只，5周齡，體重(180±10)g。SD大鼠適應性飼養(yǎng)1周后，60只大鼠按隨機原則分為5組各12只：（1)陰性對照組( C組玉米油灌胃)、（2)陽性對照組( D組雌激素灌胃)、（3)低劑量組( L組50mg/kg NP灌胃)、（4)中劑量組( M組100 mg/kg N P灌胃)、（5)

2、高劑量組( H組200 mg/kg N P灌胃)。每組連續(xù)灌胃染毒60d，灌胃體積為每100g體重0.5 m l；陰性對照組每日給予等量的玉米油；雌激素組每日給予雌激素20噸/kg/d;灌胃60天后于末次灌胃24h后于10％水合氯醛1ml麻醉下剖腹采集雄鼠腹主動脈血液各10ml及盲腸黏膜組織。
　　2、檢測指標及方法：采集各組雄性大鼠動脈血高速離心取上清液于-20℃冰箱凍存、待檢，收集各組盲腸黏膜組織一部分制成石蠟標本，一部分放-

3、80℃冰箱凍存待檢。①高效液相色譜(HPLC)法檢測血清和盲腸黏膜中N P含量；②直接化學發(fā)光法檢測血清雌激素(E2)濃度;③酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測血清雌激素受體P(ER-β)蛋白含量；④實時熒光定量聚合酶鏈反應(RT-PCR、法檢測盲腸黏膜中ER-β m RNA的表達；免疫組化SP法檢測雄鼠盲腸黏膜中ER-β蛋白含量。⑤血清壬基酚（NP)含量與盲腸黏膜組織中雌激素受體β（ER-β)作相關分析。
　　結果：1、各組雄性大鼠血

4、清中NP含量有差異，實驗染毒組NP含量較對照組升高，并且各實驗染毒組隨N P灌胃劑量增高血清N P含量升高越顯著，P＜0.05，差異有統(tǒng)計學意義。
　　2、各組雄性大鼠盲腸粘膜組織中NP含量有差異，實驗染毒組NP含量較對照組升高，并且各實驗染毒組隨NP灌胃劑量增高盲腸黏膜組織中NP含量升高越顯著，P＜0.05，差異有統(tǒng)計學意義。
　　3、各組雄性大鼠血清中E2濃度有差異，實驗染毒組E2濃度較對照組升高，并且各實驗染毒組隨N

5、P灌胃劑量增高E2濃度升高越顯著，P＜0.05，差異有統(tǒng)計學意義。
　　4、各組雄性大鼠血清中ER-β蛋白含量有差異，各實驗染毒組血清ER-β蛋白含量較對照組降低，并且各實驗染毒組隨N P灌胃劑量增高ER-P蛋白含量降低越顯著，P＜0.05，差異有統(tǒng)計學意義。
　　5、各組雄性大鼠盲腸黏膜組織中ER-β mRNA表達水平有差異，各實驗染毒組 ER-β m RNA表達水平較對照組降低，并且各實驗染毒組隨NP灌胃劑量增高ER-β

6、 m RNA表達水平降低越顯著，差異有統(tǒng)計學意義，P＜0.05;各組雄性大鼠盲腸黏膜中 ER-β蛋白含量有差異，各實驗染毒組ER-P蛋白含量較對照組降低，并且各實驗染毒組隨N P灌胃劑量增高ER-βP蛋白含量降低越顯著，差異有統(tǒng)計學意義，P＜0.05。
　　6、各實驗染毒組雄性大鼠血清N P含量與盲腸ER-P蛋白光密度值和ER-β m R N A相對表達量之間均呈現(xiàn)出負相關性(相關系數(shù)分別為r=-0.44,r=-0.63)，結果均