環(huán)境雌激素壬基酚對(duì)雄鼠結(jié)腸黏膜雌激素受體β表達(dá)影響的研究.pdf

1、目的：擬通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究壬基酚的擬雌激素樣作用是否對(duì)雄鼠結(jié)腸黏膜雌激素受體β表達(dá)有影響。
　　方法：1、實(shí)驗(yàn)分組：選用清潔級(jí)S D健康雄性大鼠60只，5周齡，體重(180±10)g。SD大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，60只大鼠按隨機(jī)原則分為5組各12只：（1)陰性對(duì)照組( C組玉米油灌胃)、（2)陽性對(duì)照組( D組雌激素灌胃)、（3)低劑量組( L組50mg/kg NP灌胃)、（4)中劑量組( M組100 mg/kg N P灌胃)、（5)

2、高劑量組( H組200 mg/kg N P灌胃)。每組連續(xù)灌胃染毒60d，灌胃體積為每100g體重0.5 m l；陰性對(duì)照組每日給予等量的玉米油；雌激素組每日給予雌激素20噸/kg/d;灌胃60天后于末次灌胃24h后于10％水合氯醛1ml麻醉下剖腹采集雄鼠腹主動(dòng)脈血液各10ml及盲腸黏膜組織。
　　2、檢測指標(biāo)及方法：采集各組雄性大鼠動(dòng)脈血高速離心取上清液于-20℃冰箱凍存、待檢，收集各組盲腸黏膜組織一部分制成石蠟標(biāo)本，一部分放-

3、80℃冰箱凍存待檢。①高效液相色譜(HPLC)法檢測血清和盲腸黏膜中N P含量；②直接化學(xué)發(fā)光法檢測血清雌激素(E2)濃度;③酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測血清雌激素受體P(ER-β)蛋白含量；④實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR、法檢測盲腸黏膜中ER-β m RNA的表達(dá)；免疫組化SP法檢測雄鼠盲腸黏膜中ER-β蛋白含量。⑤血清壬基酚（NP)含量與盲腸黏膜組織中雌激素受體β（ER-β)作相關(guān)分析。
　　結(jié)果：1、各組雄性大鼠血

4、清中NP含量有差異，實(shí)驗(yàn)染毒組NP含量較對(duì)照組升高，并且各實(shí)驗(yàn)染毒組隨N P灌胃劑量增高血清N P含量升高越顯著，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2、各組雄性大鼠盲腸粘膜組織中NP含量有差異，實(shí)驗(yàn)染毒組NP含量較對(duì)照組升高，并且各實(shí)驗(yàn)染毒組隨NP灌胃劑量增高盲腸黏膜組織中NP含量升高越顯著，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3、各組雄性大鼠血清中E2濃度有差異，實(shí)驗(yàn)染毒組E2濃度較對(duì)照組升高，并且各實(shí)驗(yàn)染毒組隨N

5、P灌胃劑量增高E2濃度升高越顯著，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　4、各組雄性大鼠血清中ER-β蛋白含量有差異，各實(shí)驗(yàn)染毒組血清ER-β蛋白含量較對(duì)照組降低，并且各實(shí)驗(yàn)染毒組隨N P灌胃劑量增高ER-P蛋白含量降低越顯著，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　5、各組雄性大鼠盲腸黏膜組織中ER-β mRNA表達(dá)水平有差異，各實(shí)驗(yàn)染毒組 ER-β m RNA表達(dá)水平較對(duì)照組降低，并且各實(shí)驗(yàn)染毒組隨NP灌胃劑量增高ER-β

6、 m RNA表達(dá)水平降低越顯著，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05;各組雄性大鼠盲腸黏膜中 ER-β蛋白含量有差異，各實(shí)驗(yàn)染毒組ER-P蛋白含量較對(duì)照組降低，并且各實(shí)驗(yàn)染毒組隨N P灌胃劑量增高ER-βP蛋白含量降低越顯著，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05。
　　6、各實(shí)驗(yàn)染毒組雄性大鼠血清N P含量與盲腸ER-P蛋白光密度值和ER-β m R N A相對(duì)表達(dá)量之間均呈現(xiàn)出負(fù)相關(guān)性(相關(guān)系數(shù)分別為r=-0.44,r=-0.63)，結(jié)果均