三株溶藻細(xì)菌的溶藻特性及其溶藻活性代謝產(chǎn)物的初步分離.pdf

1、溶藻細(xì)菌是防治水華和赤潮的潛在微生物。對(duì)廣州某池塘篩選、鑒定出的三株溶藻細(xì)菌L7、L8和L18(L7、L8為蠟狀芽孢桿菌Bacillus cereus，L18為短小芽孢桿菌Bacilluspumilu)進(jìn)行以下幾個(gè)方面的研究： 1、為探討溶藻細(xì)菌工程運(yùn)用的可行性，通過(guò)池塘模擬試驗(yàn)，觀察溶藻細(xì)菌對(duì)藻類群落結(jié)構(gòu)的影響。溶藻細(xì)菌使水體葉綠素a的含量降低，水體藻類群落結(jié)構(gòu)變化，藻類數(shù)量減少，藻類優(yōu)勢(shì)種改變。為獲得理想的溶藻效果，溶藻細(xì)菌

2、需要一定的初始濃度。 2、研究三株溶藻細(xì)菌的溶藻特性，為分離溶藻活性代謝產(chǎn)物奠定基礎(chǔ)。三株溶藻細(xì)菌的溶藻方式都為間接溶藻，都產(chǎn)生對(duì)水華魚(yú)腥藻具有較強(qiáng)溶藻效果的溶藻活性代謝產(chǎn)物。在pH值為5.5、7.0、8.5和10.0四種條件下進(jìn)行溶藻實(shí)驗(yàn)，當(dāng)pH值為8.5時(shí)，L7溶藻活性代謝產(chǎn)物對(duì)水華魚(yú)腥藻的去除率達(dá)到85.78％；當(dāng)pH值為10時(shí)，L8和L18溶藻活性代謝產(chǎn)物對(duì)水華魚(yú)腥藻的去除率分別達(dá)到92.84％和78.72％。三株溶藻細(xì)

3、菌溶藻活性代謝產(chǎn)物均具有良好的熱穩(wěn)定性，其無(wú)菌濾液分別在50℃、70℃和90℃中水浴20min，或在121℃中高溫處理20min后，對(duì)葉綠素a的去除率仍高于73％。L7的無(wú)菌濾液調(diào)至pH值4.0或2.5，兩小時(shí)后喪失溶藻活性；L8和L18的無(wú)菌濾液調(diào)至pH值4.0，兩小時(shí)后未喪失溶藻活性，調(diào)至pH值2.5，兩小時(shí)后喪失溶藻活性。 3、為獲得較高活性和濃度的目標(biāo)產(chǎn)物，研究了培養(yǎng)基對(duì)溶藻效果的影響。在牛肉膏蛋白胨、淀粉、查氏和高氏1

4、號(hào)四種培養(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)菌，淀粉培養(yǎng)基既利于分離產(chǎn)物又可獲得較高活性和濃度的目標(biāo)產(chǎn)物：對(duì)葉綠素a的去除率，L7可達(dá)93％，L8可達(dá)89％，L18可達(dá)90％。以淀粉培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，碳、氮源組合依次為淀粉+(NH<,4>)<,2>SO<,4>、淀粉+(NH<,4>)<,2>SO<,4>，葡萄糖+KNO<,3>時(shí)，三株溶藻細(xì)菌L7、L8、L18的溶藻活性代謝產(chǎn)物溶藻活性最高。對(duì)上述培養(yǎng)基的各組份進(jìn)一步從量上進(jìn)行優(yōu)化后，L7不需碳源，增大氮源量；L8