E2F1及EGR-1在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的:腎細(xì)胞癌(renal cell carcinoma，RCC)在成人惡性腫瘤中大約占2％～3％，其中腎透明細(xì)胞癌(renal clear cell carcinoma，RCCC)是腎細(xì)胞癌中最常見的惡性腫瘤。25％病人就診時(shí)已轉(zhuǎn)移，并且轉(zhuǎn)移性腎癌病人對(duì)放化療均不敏感，即使是免疫治療和分子靶向治療有效率也較低。細(xì)胞周期調(diào)節(jié)失控是腫瘤發(fā)生發(fā)展重要原因之一，同時(shí)細(xì)胞周期的調(diào)控需要多種轉(zhuǎn)錄因子相互作用共同完成。轉(zhuǎn)錄因子E2F1、早期生長(zhǎng)反應(yīng)

2、基因-1（early growth response gene-1，EGR-1）與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，但二者在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)情況尚未報(bào)道。本文旨在觀察E2F1、EGR-1在腎透明細(xì)胞癌組和對(duì)照組中的表達(dá)情況，分析二者表達(dá)與腎透明細(xì)胞癌臨床分期、病理分級(jí)、性別和年齡之間的關(guān)系，探討二者在腎透明細(xì)胞癌發(fā)生、發(fā)展中的作用。
　　方法:
　　1、選取2013年4月至2014年5月河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院泌尿外科

3、手術(shù)病人的腎透明細(xì)胞癌組織標(biāo)本48例（經(jīng)病理學(xué)證實(shí)），同時(shí)選取28例癌旁正常腎組織（為癌旁4cm以外腎組織，經(jīng)病理學(xué)證實(shí)）作為對(duì)照組。手術(shù)前所有患者均未行放療、化療、細(xì)胞因子及分子靶向等治療。所有標(biāo)本分為兩份，一份經(jīng)10％的中性緩沖甲醛溶液固定，石蠟包埋，4μm厚連續(xù)切片;另一份置于-80℃冰箱中保存。
　　2、應(yīng)用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)E2F1、EGR-1蛋白在腎透明細(xì)胞癌組和對(duì)照組中的表達(dá)情況。應(yīng)用RT-PCR方法檢測(cè)E2F1、E

4、GR-1在腎透明細(xì)胞癌組和對(duì)照組中mRNA的表達(dá)情況，采用兩者mRNA的積分吸光度比值表示結(jié)果。
　　3、記錄48例腎透明細(xì)胞癌患者的年齡、性別、臨床分期及病理分級(jí)情況。應(yīng)用免疫組織化學(xué)法分別檢測(cè)E2F1、EGR-1在48例腎透明細(xì)胞癌組織中的表達(dá)情況，分析二者與患者的年齡、性別、臨床分期及病理分級(jí)的關(guān)系，分析E2F1、EGR-1在48例腎透明細(xì)胞癌組織中表達(dá)的相關(guān)關(guān)系。
　　4、應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)。分析E

5、2F1、EGR-1在腎透明細(xì)胞癌組和對(duì)照組中陽性表達(dá)率之間的差異，在腎透明細(xì)胞癌組中比較二者與患者臨床病理特征的關(guān)系，應(yīng)用，檢驗(yàn)或Fisher確切概率法檢驗(yàn);在腎透明細(xì)胞癌組中，E2F1與EGR-1表達(dá)的相關(guān)關(guān)系采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析;E2F1、EGR-1的mRNA積分吸光度值以(x)±s表示，采用t檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較。P＜0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　1、免疫組織化學(xué)法顯示:E2F1蛋白表達(dá)主要分布于

6、細(xì)胞核中，在腎透明細(xì)胞癌組中陽性表達(dá)率為75％(36/48)，明顯高于對(duì)照組32.1％(9/28)（P＜0.05）。EGR-1蛋白表達(dá)也主要分布于細(xì)胞核中，在腎透明細(xì)胞癌組中陽性表達(dá)率為79.2％(38/48)明顯高于對(duì)照組35.7％(10/28)(P＜0.05)。RT-PCR結(jié)果顯示:E2F1在對(duì)照組及腎透明細(xì)胞癌組中的積分吸光度值分別為0.1225±0.0237、0.2628±0.0656，腎透明細(xì)胞癌組明顯高于對(duì)照組(P＜0.05

7、); EGR-1在對(duì)照組及腎透明細(xì)胞癌組中的積分吸光度值分別為0.1279±0.0266、0.2788±0.0893，腎透明細(xì)胞癌組明顯高于對(duì)照組(P＜0.05)。
　　2、在48例腎透明細(xì)胞癌組中，男性31例，女性17例，年齡45-76歲。根據(jù)1997年Fuhrman分級(jí)進(jìn)行病理組織分級(jí)，其中高分化10例，中分化19例，低分化19例;根據(jù)國際2010年AJCC腎癌TNM分期標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行臨床分期:Ⅰ期10例、Ⅱ期18例、Ⅲ期16例和Ⅳ

8、期4例。E2F1、EGR-1在腎透明細(xì)胞癌組的表達(dá)具有正相關(guān)性(r=0.533，P＜0.01)。其中，E2F1在腎透明細(xì)胞癌組織中的表達(dá)，在Ⅲ-Ⅳ期組明顯高于在Ⅰ-Ⅱ期組中的表達(dá)(x2=7.314，P＜0.01)，在低分化組明顯高于在中、高分化組中的表達(dá)(x2=6.534，P＜0.05)。EGR-1在腎透明細(xì)胞癌組織中的表達(dá)，在Ⅲ-Ⅳ期組明顯高于在Ⅰ-Ⅱ期組中的表達(dá)(x2=5.211，P＜0.05)，在低分化組明顯高于在中、高分化組中的

9、表達(dá)(x2=8.276，P＜0.01)。然而，E2F1、EGR-1在48例腎透明細(xì)胞癌組織中的表達(dá)與患者性別、年齡無關(guān)(P＞0.05)。
　　結(jié)論:
　　1、E2F1、EGR-1在腎透明細(xì)胞癌組中的表達(dá)均高于在對(duì)照組中的表達(dá)。
　　2、E2F1、EGR-1蛋白在腎透明細(xì)胞癌組織中的表達(dá)與患者腫瘤的臨床分期及病理分級(jí)有關(guān)，而與患者的性別、年齡無關(guān)。
　　3、E2F1、EGR-1蛋白在腎透明細(xì)胞癌組織中的表達(dá)具有正相