R-a-lipoic acid激活肝CREBH和Insig信號系統(tǒng)在抗高甘油三酯血癥的機(jī)制研究.pdf

1、目的：固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白(sterol regulatory element binding proteins,SREBPs)的激活受胰島素誘導(dǎo)因子-1和-2（insulin-induced genes-1 and-2，Insig-1 and Insig-2）和SREBP裂解激活蛋白(SREBP cleavage-activatingprotein，SCAP)的調(diào)節(jié)。早前的研究已表明R-α-lipoic acid(LA)可改善Zuck

2、er糖尿病肥胖大鼠(Zucker Diabetic Fatty rats，ZDF rats)嚴(yán)重的高甘油三酯血癥。本課題主要研究環(huán)LA降低甘油三酯機(jī)制中腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白H(cAMP-responsive element-binding protein H，CREBH)及其在SREBP-1c和Insig通路中的作用。
　　方法：細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，肝腫瘤細(xì)胞系McA-RH7777用高糖培養(yǎng)基(含總葡萄糖31mM)誘導(dǎo)CREBH的表達(dá)，同

3、時(shí)加入LA后，可進(jìn)一步增高CREBH的表達(dá)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，LA飼養(yǎng)9周齡ZDF大鼠兩周后處死，采集血液及肝組織。以上實(shí)驗(yàn)標(biāo)本分別用PCR檢測脂代謝轉(zhuǎn)錄水平相關(guān)基因的表達(dá)，用蛋白免疫印跡檢測對應(yīng)基因的翻譯水平。
　　結(jié)果：1、用LA（200μM）和葡萄糖(6mM)的培養(yǎng)基培養(yǎng)McA細(xì)胞可激活CREBH。McA細(xì)胞經(jīng)6μM葡糖糖處理后再加LA可進(jìn)一步誘導(dǎo)Insig-1和Insig-2amRNA的表達(dá)，但不會(huì)誘導(dǎo)Insig-2b的表達(dá)。2、

4、活體實(shí)驗(yàn)表明，用LA飼養(yǎng)ZDF大鼠可激活肝CREBH和刺激Insig-1和Insig-2a的轉(zhuǎn)錄和翻譯。LA誘導(dǎo)CREBH和Insigs的表達(dá)可抑制SREBP-1c前體進(jìn)入細(xì)胞核，進(jìn)一步可抑制脂肪酸合成相關(guān)基因的表達(dá)，如FASN、ACC和SCD-1，從而降低經(jīng)葡糖糖處理的McA細(xì)胞和ZDF大鼠肝組織中的甘油三酯。另外，在經(jīng)葡糖糖處理的McA細(xì)胞和ZDF大鼠肝組織中，LA還可降低極低密度脂蛋白相關(guān)的載脂蛋白，如apoB100和apoE，進(jìn)