自噬相關(guān)基因在慢性非細菌性前列腺炎大鼠模型中的表達及意義.pdf

1、目的：
　　通過探索自噬相關(guān)基因自噬微管相關(guān)蛋白1輕鏈3（LC3）和Beclin-1在慢性非細菌性前列腺炎（CNP）大鼠模型中的異常表達及時序變化，探討自噬在慢性非細菌性前列腺炎中的可能作用。
　　方法：
　　（1）取6只300 g左右的雄性S D大鼠，無菌條件下完整剪下前列腺組織，剪刀剪碎后放在玻璃勻漿器中勻漿，勻漿后于冷凍離心機離心，12000 r/min，4℃，30 min,吸取上清液，BCA法稀釋蛋白提純液至4

2、0 g/L；（2）取3月齡雄性SD大鼠40只隨機分為正常對照組、2周CNP模型組、4周CNP模型組、6周CNP模型組，每組10只，CNP模型組采用前列腺抗原原位注射法，每只大鼠注射0.2ml前列腺蛋白提純液，對照組原位注射等量生理鹽水；（3）HE染色觀察各組前列腺組織炎性細胞浸潤情況；（4）采用免疫組化SABC法檢測各組前列腺組織中LC3、Beclin-1的表達情況；（5）采用Western blot法檢測各組前列腺組織中 LC3-Ⅰ/

3、Ⅱ的轉(zhuǎn)化水平和Bec lin-1的表達情況；（6）運用SPSS16.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料采用x、s表示，多組間比較采用One-Way ANOVA分析，兩兩比較采用S NK-q檢驗，檢驗水準α=0.05。
　　結(jié)果：
　?。?）成功提取前列腺蛋白提純液至濃度為40 g/L；（2） HE染色結(jié)果提示各模型組成功構(gòu)建大鼠慢性非細菌性前列腺炎，正常對照組未見明顯炎癥表現(xiàn)。6周模型組炎癥浸潤情況高于4周模型組和2周模型組；（

4、3）免疫組化法檢測顯示各實驗組LC3、Beclin-1蛋白的表達均高于對照組并隨時間的推移表達量逐漸升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；（4）Western blot法檢測各模型組LC3-Ⅰ/Ⅱ的轉(zhuǎn)化水平均高于正常對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。2周模型組和4周模型組LC3-Ⅰ/Ⅱ的轉(zhuǎn)化差異無統(tǒng)計學(xué)意義。6周模型組LC3-Ⅰ/Ⅱ的轉(zhuǎn)化水平高于2周模型組和4周模型組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論