He-Ne激光和增強UV-B輻射對小麥幼苗微管結合蛋白MAP65s的影響.pdf

1、微管結合蛋白與微管特異地結合在一起，參與調節(jié)微管的結構與功能，目前已成為植物細胞骨架研究的前沿領域。MAP65s是一類植物所特有的，在進化上保存下來的微管結合蛋白。本研究以“ML7113”小麥為材料，通過免疫印跡實驗鑒定小麥幼苗中微管結合蛋白MAP65s的存在并利用紫外吸收法和SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法初步探究了體外MAP65s對微管聚合的影響，為進一步研究MAP65s蛋白的生理功能提供了重要的依據。在此基礎上，本研究分別對CK組（對

2、照組）、B組(UV-B處理組)、L組（He-Ne激光處理組）、BL組（UV-B和He-Ne激光復合處理組）小麥幼苗的MAP65s進行提取，并通過測定各處理組中小麥幼苗MAP65s的含量，來研究He-Ne激光和增強UV-B輻射對小麥幼苗MAP65s的影響。另外，本研究采用間接免疫熒光標記技術和激光共聚焦掃描顯微系統分別對CK組和B組中MAP65s和染色體進行雙標記，用以探究小麥體細胞內MAP65s與染色體分布的相關性，初步探討MAP65s

3、與“分束分裂”的關系。結果表明:
　　 (1)利用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳技術檢測蛋白條帶后，發(fā)現目的蛋白條帶清晰，分子量為65KD左右;免疫印跡結果表明，65KD左右的條帶確實為MAP65s，從而確定在小麥幼苗中存在MAP65s。
　　 (2)對不同日齡小麥幼苗葉片和根中的MAP65s含量進行測定，發(fā)現7日齡小麥葉片和根中MAP65s含量均較多，進而選擇7日齡小麥幼苗為后續(xù)實驗的最佳材料。
　　 (3)共沉淀

4、實驗結果顯示，MAP65s可與微管結合，具有一般微管結合蛋白的基本特性;濁度法實驗顯示，MAP65s對微管聚合的影響與其濃度相關，低濃度促進微管聚合，高濃度則抑制微管聚合。
　　 (4)經UV-B輻射處理(B)后，小麥幼苗中的MAP65s含量低于對照組(CK)(P＜0.01);單獨He-Ne激光(L)處理，MAP65s含量高于對照組(CK)(P＜0.05);經He-Ne激光和UV-B復合處理(BL)后，MAP65s含量高于UV-

5、B處理組，低于CK組。該結果表明:一定劑量的He-Ne激光輻照能夠促進小麥幼苗微管結合蛋白MAP65s的合成，并且可能在一定程度上緩解增強UV-B輻射對小麥幼苗微管骨架系統造成的損傷。
　　 (5)增強UV-B輻射導致小麥根尖分生區(qū)細胞出現“不均等分裂”、“染色體單橋”、“染色體雙橋”等異常分裂現象。
　　 (6)與對照組相比，增強UV-B輻射處理的小麥根尖細胞中MAP65s的熒光變暗，強度減弱，可推測MAP65s在增強