增強UV-B輻射和He-Ne激光輻照對小麥CENPA和一氧化氮合成相關酶的影響.pdf

1、近年來，關于CENPA的結構與功能受到了人們的普遍關注，其中CENPA的表達或結構異常與細胞分裂過程中的染色體分離異常之間的關系已經成為人們研究CENPA功能的熱點問題。本文以‘臨優(yōu)2018’小麥為材料，分別用直接酸抽提法、酸抽提-乙醇沉淀法、酸抽提-三氯乙酸沉淀法提取小麥中的CENPA，并應用bradford法、SDS-PAGE及間接免疫熒光技術對其進行定量、檢測及鑒定。比較這三種不同的提取方法尋找適合小麥CENPA的提取方法。在此基

2、礎上，我們確定采用直接酸抽提法分別對CK組(對照組)、B組(UV-B輻射組)、BL組(UV-B和激光復合處理組)、L組(激光處理組)小麥幼苗的CENPA進行提取，并測定了不同處理天數(shù)下各處理組小麥幼苗CENPA的含量，來研究增強UV-B輻射和He-Ne激光對小麥幼苗CENPA的影響，初步探討CENPA與異常分裂的關系。另外，本研究還對各處理組小麥幼苗根的一氧化氮合成酶(NOS)和硝酸還原酶(NR)進行了提取、定量及比較分析，來研究增強U

3、V-B輻射和He-Ne激光對小麥幼苗CENPA的影響，初步探討一氧化氮合成相關酶對UV-B脅迫的響應機制。結果表明：
　　 (1)直接酸抽提法提取小麥CENPA，操作簡單，提取效率高；電泳結果顯示，其雜質干擾少、條帶清晰、分辨率高、目的蛋白得率適中。免疫印跡結果表明，17kd左右的條帶確實為CENPA蛋白。確定采用直接酸抽提法作為后續(xù)實驗小麥CENPA的提取方法。
　　 (2)實驗處理五天時，增強UV-B輻射和He-Ne

4、激光輻照對小麥幼苗根和葉中的CENPA含量有明顯的影響且影響效果基本相同。經UV-B輻射后，小麥幼苗根和葉中CENPA含量較對照組均有很大程度的下降(P<0.01)，表現(xiàn)為一定的抑制作用。單獨的He-Ne激光處理后，小麥根和葉中的CENPA含量相對于對照組無顯著差異(P>0.05)，說明He-Ne激光輻照對小麥CENPA含量沒有不利影響。經He-Ne激光和UV-B輻射復合處理后，小麥幼苗根和葉中的CENPA含量明顯高于B組，并接近CK組

5、，表現(xiàn)為一定的促進作用，說明He-Ne激光能促進UV-B輻射后CENPA蛋白的合成，使其含量升高。
　　 (3)增強UV-B輻射后，小麥幼苗根中一氧化氮合成酶(NOS)含量明顯增多；單獨He-Ne激光處理后，NOS含量相對于對照組顯著增多；而UV-B輻射與He-Ne激光輻照復合處理后，NOS含量高于對照組同時也高于B組，說明He-Ne激光能進一步促進UV-B輻射后NOS的合成，提高小麥對UV-B輻射的抗性。
　　 增強U