增強UV-B輻射與He-Ne激光輻照小麥細胞凋亡影響的研究.pdf

1、近年來，植物細胞凋亡的誘導途徑和信號調(diào)控機理已經(jīng)成為人們研究的熱點問題。本研究以小麥(臨優(yōu)2018)為材料，采用10.08 kJ·m-2·d-1 UV-B輻射與5mW·mm-2 He-Ne激光輻照及二者組合對其幼苗進行處理，篩選出了適合流式細胞儀分析的小麥幼苗根細胞核提取的方法，并對各處理組小麥幼苗根在不同處理天數(shù)下細胞凋亡的變化，以及相關(guān)信號通路和抗氧化系統(tǒng)的變化情況進行研究。結(jié)果顯示：
　　 (1)在直接剪切法所用的三種細胞

2、核提取緩沖液中，MgSO4緩沖液的提取效果最好，細胞核形態(tài)及內(nèi)部結(jié)構(gòu)完整，且得到的細胞核量多；OttoⅠ對細胞核的提取效果顯著，但是在加入OttoⅡ后細胞核破裂明顯；Tris·MgCl2緩沖液提取的細胞核數(shù)量較少；酶解法制備的細胞核懸浮液中雜質(zhì)較多，且需時較長。結(jié)果表明采用MgSO4提取緩沖液的直接剪切法適合于流式細胞儀對小麥幼苗DNA含量的分析。
　　 (2)增強UV-B輻射能誘導小麥幼苗根尖細胞出現(xiàn)細胞核向中心聚集，并形成凋

3、亡小體等細胞凋亡現(xiàn)象。用流式細胞儀對不同處理組細胞凋亡情況進行定量分析，結(jié)果同樣證明了增強UV-B處理能增加凋亡的細胞數(shù)目，并且在處理第5d時變化最為明顯。而經(jīng)UV-B輻射和He-Ne激光復合處理后，細胞凋亡數(shù)目比單獨UV-B處理組明顯減少，差異極顯著。因此認為He-Ne激光在一定程度上緩解了增強UV-B輻射對小麥幼苗根細胞的凋亡。
　　 (3)增強UV-B輻射使小麥幼苗根O2-和H2O2等活性氧積累，而且線粒體膜通透性會隨著增

4、強UV-B輻射處理天數(shù)增加而增大，同時造成線粒體細胞色素c的釋放，誘導細胞凋亡的產(chǎn)生。He-Ne激光則能夠在一定程度上減少活性氧的形成并且使細胞色素c釋放量減少，有一定的修復作用。
　　 (4)增強UV-B輻射會造成小麥幼苗根抗氧化酶(POD、CAT、SOD)活性和非酶類抗氧化物(GSH、AsA)含量下降，還會造成POD、CAT和SOD同工酶的表達抑制，酶帶有不同程度的減弱或消失，而He-Ne激光則對此損傷有部分的修復作用，提高