He-Ne激光和增強(qiáng)UV-B輻射對(duì)小麥TaRAN1蛋白影響的研究.pdf

1、Ran屬于小G蛋白家族，是一類主要定位于細(xì)胞核的具GTP水解酶活性的蛋白。動(dòng)物Ran蛋白功能研究比較多，在核質(zhì)間物質(zhì)的運(yùn)輸、有絲分裂中紡錘體的形成以及核膜的組裝等方面具有重要的調(diào)控作用。關(guān)于植物Ran蛋白功能的研究還比較少，因此本研究以小麥“ML7113”品種為材料，采用10.08kJ·m-2·d-1UV-B輻射與5mW·mm-2He-Ne激光輻照對(duì)其幼苗進(jìn)行處理，對(duì)小麥細(xì)胞核內(nèi)的Ran蛋白進(jìn)行分離提取，運(yùn)用SDS-PAGE和Weste

2、rn-blot分析檢測(cè)He-Ne激光和增強(qiáng)UV-B輻射對(duì)小麥TaRAN1蛋白含量的影響;通過間接免疫熒光標(biāo)記法和激光共聚焦顯微掃描技術(shù)，研究UV-B輻射對(duì)小麥TaRAN1蛋白分布與定位的影響，從而初步揭示“分束分裂”細(xì)胞中TaRAN1蛋白的作用機(jī)理;利用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)增強(qiáng)UV-B輻射對(duì)小麥幼苗葉片細(xì)胞中Ran基因的影響，進(jìn)而探討TaRAN1在UV-B脅迫下的作用機(jī)制。主要研究結(jié)果如下:
　　 (1)增強(qiáng)UV-B輻射使小麥T

3、aRAN1蛋白電泳條帶加寬顏色加深且含量顯著增加;單獨(dú)He-Ne激光處理，蛋白電泳條帶較窄顏色較淡且所測(cè)的蛋白含量明顯減少，表現(xiàn)出了抑制作用;經(jīng)He-Ne激光輻照和UV-B輻射復(fù)合處理后，蛋白的含量明顯低于B組而與對(duì)照組相差不明顯。說明增強(qiáng)UV-B輻射后，小麥TaRAN1蛋白可能參與了植物的抗逆境反應(yīng);測(cè)序分析，增強(qiáng)UV-B輻射后，堿基相對(duì)應(yīng)的氨基酸序列有5個(gè)位點(diǎn)發(fā)生了突變，且與正常組的相似性為87％。
　　 (2)正常細(xì)胞中，