斑點(diǎn)叉尾鮰病毒克隆抗體及血清免疫球蛋白多克隆抗體的制備及初步應(yīng)用.pdf

1、斑點(diǎn)叉尾鮰病毒病是由斑點(diǎn)叉尾鮰病毒引起的，能夠引起斑點(diǎn)叉尾鮰魚(yú)苗和魚(yú)種的死亡，給養(yǎng)殖戶造成重大的經(jīng)濟(jì)損失。目前對(duì)于該病沒(méi)有有效的藥物進(jìn)行治療，比較有效的方法是及時(shí)發(fā)現(xiàn)病原，并予以清除，這需要建立快速、有效的檢測(cè)方法。本文選擇斑點(diǎn)叉尾鮰病毒和斑點(diǎn)叉尾鮰血清1gM進(jìn)行研究，并分別以它們?yōu)槊庖咴苽淇共《镜膯慰寺】贵w和抗血清的多克隆抗體，并初步應(yīng)用于免疫學(xué)研究，為建立斑點(diǎn)叉尾鮰病毒快速檢測(cè)方法奠定基礎(chǔ)。
　　 通過(guò)細(xì)胞增殖的方法獲得

2、大量病毒，通過(guò)超速離心，純化后的病毒濃度達(dá)到4mg/ml。采用純化后的病毒為免疫原，按照設(shè)計(jì)好的免疫程序，制備得到6株針對(duì)CCV的單克隆抗體，命名為1F1，1B7，3E4，3G10，4C4和4D4。其中3株單克隆抗體的效價(jià)達(dá)到1:256000，分別是1F1，1B7和3E4，其它3株效價(jià)稍低。免疫熒光實(shí)驗(yàn)表明制備的單克隆抗體具有良好的特異性。除了3E4外，5株單克隆抗體都能很好的阻斷病毒對(duì)細(xì)胞的感染。通過(guò)免疫印跡實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)出各單抗所結(jié)合蛋