水飛薊賓對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌外排系統(tǒng)的抑制作用.pdf

1、近年由于抗生素的廣泛使用，金黃色葡萄球菌的耐藥性逐漸增強(qiáng)，致使耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)出現(xiàn)并已成為嚴(yán)重影響人類生命健康的一類致病菌。其中報道的主要耐藥機(jī)制為細(xì)菌主動外排系統(tǒng)引起的藥物的外排，因此尋找一種有效的外排抑制劑是解決問題的關(guān)鍵。本論文從25種中藥中篩選出對MRSA外排系統(tǒng)有抑制作用的藥物，并以其中的水飛薊賓為實驗材料，研究了其抑制MRSA外排系統(tǒng)的作用機(jī)制，結(jié)果如下:
　　(1)通過藥物抑菌活性的測定及聯(lián)合藥敏

2、試驗，從25種中藥中篩選出沒有抑菌活性，但與環(huán)丙沙星和苯扎氯銨聯(lián)用后具有協(xié)同作用的潛在外排泵抑制劑水飛薊;
　　(2)通過雙平板法及熒光分光光度法進(jìn)一步測定了水飛薊對MRSA41577外排系統(tǒng)的抑制作用，實驗表明水飛薊能抑制菌體外排泵對環(huán)丙沙星的外排而恢復(fù)藥物對MRSA41577的抑制作用，是MRSA41577的外排泵抑制劑;
　　(3)以水飛薊主要活性成分水飛薊賓單體化合物為研究對象，通過聯(lián)合藥敏試驗以及雙平板法測定水飛薊

3、賓對MRSA41577外排系統(tǒng)的作用，結(jié)果表明水飛薊賓能恢復(fù)環(huán)丙沙星及苯扎氯銨的殺菌和抑菌作用并對MRSA41577外排系統(tǒng)具有抑制作用，是外排泵抑制劑;
　　(4)通過實時熒光定量PCR的方法檢測水飛薊賓對外排基因norA和qacA/B的表達(dá)，結(jié)果顯示水飛薊賓能降低兩種外排基因的表達(dá)量，抑制率分別為36％和49％。表明水飛薊賓對MRSA41577外排系統(tǒng)的作用機(jī)制是通過減少外排基因表達(dá)，進(jìn)而減少外排蛋白的合成，以增加藥物在菌體內(nèi)