四君地芍方法治療腹瀉型腸易激綜合征的實驗研究.pdf

1、目的：腸易激綜合征(Irritable Bowel Syndrome，IBS)是一種常見的功能性胃腸病，臨床以腹瀉型腸易激綜合征(IBS-D)多見，中醫(yī)藥治療本病有豐富的經(jīng)驗。四君地芍方是導(dǎo)師應(yīng)用于臨床的經(jīng)驗方。本實驗通過建立脾虛型IBS-D大鼠模型，觀察四君地芍方對IBS-D大鼠血清白細胞介素1β(IL-1β)、血清五羥色胺(5-HT)、血漿P物質(zhì)(SP)、血漿血管活性肽(VIP)含量的影響，探討該方治療脾虛型IBS-D的可能作用機制

2、。
　　方法：正常適應(yīng)性飼養(yǎng)5天后，清潔級Wistar大鼠(♂)100只，根據(jù)隨機分組法分為5組，每組20只，分別為空白組(N組)、模型組(M組)、對照組(C組)、四君地芍方大劑量組(HD組)、四君地芍方小劑量組(LD組)。空白組：繼續(xù)正常喂養(yǎng)、不造模、不給任何藥物。其余各組采用番瀉葉灌胃法制作脾虛型IBS-D大鼠模型，根據(jù)文獻，除空白組外，其余各組灌服濃度為0.3g/mL番瀉葉煎劑，每日一次，持續(xù)3周。造模過程中觀察大鼠糞便情況

3、。造模結(jié)束后進行局部結(jié)腸組織病理檢查：每組隨機取2只大鼠，斷頭處死后，立即剖腹取材，取一段結(jié)腸組織，以生理鹽水清洗腸內(nèi)容物后，放入10％中性甲醛固定24小時后常規(guī)脫水、石蠟包埋、HE染色，待做病理檢查，以排除腸粘膜炎性病變。造模成功后模型組給予2ml生理鹽水灌胃；對照組予以匹維溴銨片(1.5mg/ml)灌胃(20ml/kg)；大劑量組：按30g生藥/kg/d四君地芍方混懸液灌胃；小劑量組：按15g生藥/kg/d四君地方方混懸液灌胃。治療

4、2周后，停止給藥并禁食水24小時后，斷頭處死取血，分離血漿、血清，置-20℃低溫冰箱保存待測血漿SP、血漿VIP、血清5-HT、血清IL-1β。采用免疫組化法檢測大鼠血清IL-1β、血清5-HT、血漿SP、血漿VIP含量變化。根據(jù)觀察結(jié)果進行有效性評價，統(tǒng)計學(xué)處理用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計處理，數(shù)據(jù)用(X-±s)表示，分析四君地芍方對血清IL-1β、5-HT、血漿SP、VIP含量的影響。
　　結(jié)果：⑴與空白組比較，造模大鼠

5、在第3天開始出現(xiàn)稀便，精神萎靡，毛色枯槁，造模兩周時模型大鼠糞便均為稀便，便潛血試驗為陰性，所有大鼠肛周均有不同程度糞便，形體消瘦，被毛光澤度差，且被毛松散，飲食量明顯減少。用藥治療后，三治療組在止瀉及改善大鼠體重方面，中藥大劑量組明顯優(yōu)于其他兩組(P<0.05)。⑵造模后肉眼及鏡下觀察大鼠結(jié)腸組織，各組均未發(fā)現(xiàn)明顯潰瘍、出血糜爛及明顯炎性細胞浸潤等情況，各組間無明顯差異。⑶空白組血清IL-1β含量與各組比較有顯著性差異，明顯低于其他各

6、組(P<0.05)；模型組大鼠血清IL-1β含量與各組比較均有顯著性差異，明顯高于其他各組(P<0.05)；治療組兩兩比較有顯著性差異(P<0.05)，中藥大劑量組在降低血清IL-1β含量上明顯優(yōu)于另兩組。⑷空白組血清5-HT含量與各組比較有顯著性差異，明顯低于其他各組(P<0.05)；模型組大鼠血清5-HT與各組比較均有顯著性差異，明顯高于其他各組(P<0.05)；各治療組兩兩比較，對照組與中藥大劑量組無顯著性差異(P>0.05)，均

7、優(yōu)于中藥小劑量組(P<0.05)。⑸空白組血漿SP含量與中藥大劑量組比較無差異(P>0.05)，與模型組、對照組及中藥小劑量組比較有顯著性差異(P<0.05)；模型組大鼠血漿SP含量與各組比較均有顯著性差異，明顯高于其他各組(P<0.05)；治療組血漿SP含量兩兩比較有顯著性差異，中藥大劑量組在降低血漿SP含量上明顯優(yōu)于其他各組(P<0.05)。⑹空白組血漿VIP含量與各治療組比較有顯著性差異，明顯低于其他各組(P<0.05)；模型組大

8、鼠血漿VIP含量與各組比較均有顯著性差異，明顯高于其他各組(P<0.05)；各治療組血漿VIP含量兩兩比較有顯著性差異(P<0.05)，中藥大劑量組在降低血漿VIP含量上明顯優(yōu)于對另兩組(P<0.05)。
　　結(jié)論：四君地芍方能改善脾虛型IBS-D大鼠腹瀉、體重等一般情況，本方可能是通過調(diào)整紊亂的5-HT、SP、IL-1β、VIP等胃腸激素的分泌、釋放，進而發(fā)揮抗炎、調(diào)整腸道運動、抑制腸道的異常分泌、降低腸道敏感性、增強腸道粘膜免