黃瓜抗白粉病染色體片段導(dǎo)入系的鑒定及候選基因預(yù)測.pdf

1、黃瓜白粉病是黃瓜(Cucumis sativus L.)生產(chǎn)上的三大病害之一，發(fā)病嚴(yán)重時不但降低植株的光合效能，同時影響植株產(chǎn)量和果實品質(zhì)，因此白粉病抗性育種研究已經(jīng)成為黃瓜育種的主要目標(biāo)之一。本實驗室前期通過田間自然發(fā)病鑒定和人工接種白粉病菌鑒定，篩選獲得了黃瓜高抗白粉病自交系JIN5-508（長蔓，DI=0）和易感自交系D8（短蔓，DI:38左右）。利用JIN5-508與D8為親本雜交，以D8作為輪回親本進(jìn)行連續(xù)12代回交，而后自交

2、獲得了17個以D8為遺傳背景但抗白粉病的染色體片段導(dǎo)入系。
　　本研究旨在通過對上述17個染色體片段導(dǎo)入系進(jìn)行病情指數(shù)和株高的鑒定，結(jié)合SSR分子標(biāo)記對黃瓜片段導(dǎo)入系進(jìn)行鑒定，在此基礎(chǔ)上得到抗病導(dǎo)入片段特征，預(yù)測基因以進(jìn)行抗白粉病功能驗證。同時，以片段導(dǎo)入系與D8作為親本構(gòu)建次級F2群體可以對黃瓜抗白粉病基因進(jìn)行精細(xì)定位，將為黃瓜抗白粉病候選基因克隆及創(chuàng)新種質(zhì)、選育抗白粉病品種奠定重要基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:
　　1.對導(dǎo)入

3、系及親本進(jìn)行表型特征鑒定。導(dǎo)入系的株高較蔓生親本JIN5-508均明顯矮化，與矮生親本D8的株高相近或差異不顯著甚至矮于D8。即在與D8多次回交的過程中，矮生性這一特異性狀的遺傳背景基本趨于輪回親本，片段導(dǎo)入系與D8的差異主要在于對白粉病抗性的差異。不同導(dǎo)入系對白粉病抗性存在一定差異，有64.71％的品系病情指數(shù)低于D8（5％顯著水平）。
　　2.利用324對平均分布于黃瓜7條染色體上的SSR引物對導(dǎo)入系進(jìn)行鑒定，有74對SSR引

4、物在親本間呈現(xiàn)多態(tài)性，占22.8％。鑒定得到7個黃瓜抗白粉病導(dǎo)入片段，分別位于Chr.129.3cM～30.0cM(0.7cM)和41.3cM～43.3cM(2.0cM)、Chr.20.0cM～3.9cM(3.9cM)、Chr.354.0cM～55.9cM(1.9cM)和77.1cM～78.2cM(1.1cM)、Chr.434.4cM～35.1 cM(0.7cM)和Chr.61.8cM～3.2cM(1.4cM)處，出現(xiàn)的頻率分別為61.

5、9％、11.1％、14.3％、33.3％、65.1％、7.9％和11.1％。在63株表型為抗白粉病的單株中，單片段、雙片段、三片段和四片段導(dǎo)入系分別為13、31、16和3株，分別占20.6％、49.2％、25.4％和4.8％。
　　3.對目標(biāo)片段Chr.129.3cM～30.0cM(0.7cM)和Chr.377.1cM～78.2cM(1.1cM)區(qū)域進(jìn)行抗白粉病候選基因預(yù)測。0.7cM片段的物理距離為96.3kb，預(yù)測到15個候選