球孢白僵菌侵染毒力影響因素的分析.pdf

1、白僵菌是目前人們研究和應(yīng)用最多的病源真菌之一，白僵菌作為生物制劑的應(yīng)用已經(jīng)有百年歷史，但是應(yīng)用范圍僅限于高溫高濕地帶的林場(chǎng)和牧場(chǎng)地區(qū)。同時(shí)白僵菌生防制劑沒(méi)有固定的生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)量保證，人們使用白僵菌制劑的方法粗放而效果很差。本文旨在以鱗翅目代表昆蟲(chóng)——家蠶為實(shí)驗(yàn)昆蟲(chóng)，分析了白僵菌侵染毒力相關(guān)因素，為制定白僵菌生防制劑的生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)和使用方法提供科學(xué)參考依據(jù)。
　　影響白僵菌侵染毒力的因素很多，本文測(cè)定了十株白僵菌的半數(shù)發(fā)病時(shí)間和半數(shù)死亡

2、時(shí)間，來(lái)代表白僵菌的侵染毒力。文中分別檢測(cè)了十株白僵菌的胞外酶活（包括胞外蛋白酶、胞外幾丁質(zhì)酶和β-N-乙酰葡糖苷酶），孢子濃度和萌發(fā)率，家蠶不同生理時(shí)期以及環(huán)境溫度和濕度等因素對(duì)白僵菌侵染家蠶毒力的影響，并做了胞外蛋白酶活和孢子萌發(fā)率對(duì)白僵菌侵染毒力影響的反證實(shí)驗(yàn)，得出以下結(jié)果:
　　1、白僵菌感染家蠶的發(fā)病時(shí)間(TTP)和死亡時(shí)間(TTD)均比常見(jiàn)的農(nóng)林害蟲(chóng)要快很多，最快半數(shù)發(fā)病時(shí)間為35.4小時(shí)，最快半數(shù)死亡時(shí)間為53.6小

3、時(shí);白僵菌侵染到致死需要經(jīng)歷一段時(shí)間，約18個(gè)小時(shí)，這期間，家蠶體內(nèi)的理化性質(zhì)和免疫系統(tǒng)可能起到了一定的延遲作用。
　　2、十株球孢白僵菌的TTP和TTD與胞外蛋白酶活、幾丁質(zhì)酶活、β-N-乙酰葡糖苷酶活均呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)關(guān)系，即酶活性越高，其發(fā)病和死亡時(shí)間相對(duì)越短。其中，與胞外蛋白酶活呈線性關(guān)系，與幾丁質(zhì)酶活、β-N-乙酰葡糖苷酶活呈現(xiàn)指數(shù)關(guān)系。
　　3、白僵菌侵染家蠶的毒力與孢子濃度呈指數(shù)相關(guān)，孢子濃度越高，其毒力越強(qiáng)。孢子濃

4、度達(dá)到1×106個(gè)/ml以上的時(shí)候就可以對(duì)家蠶有效的侵染和致死;當(dāng)濃度低于1×103個(gè)/ml時(shí)候，則白僵菌不能夠完成侵染;白僵菌的半數(shù)致死孢子濃度約為1×105個(gè)/ml。
　　4、TTP和TTD與孢子萌發(fā)率呈線性相關(guān)，孢子萌發(fā)率越高，其半數(shù)發(fā)病時(shí)間和半數(shù)死亡時(shí)間越早，也就是說(shuō)起相對(duì)毒力也越強(qiáng)。
　　5、在家蠶弱蟲(chóng)的時(shí)候，最易感染白僵菌，并且致死率非常高;在相對(duì)濕度在80～90％左右，溫度在25～30℃的時(shí)候，白僵菌侵染家蠶的

5、毒力最強(qiáng)。
　　6、PMSF能夠有效抑制胞外蛋白酶活，降低毒力;蛋白磷酸酶抑制劑復(fù)合物能有效保護(hù)胞外蛋白酶不被磷酸化，提升毒力;潮霉素B能夠有效的抑制白僵菌孢子的萌發(fā)和生長(zhǎng)，進(jìn)而降低其侵染毒力。
　　綜上所述，球孢白僵菌胞外酶活性是白僵菌侵染家蠶穿透體壁過(guò)程中主要的內(nèi)在因素。可以用胞外蛋白酶活性來(lái)指示其侵染毒力的大小，并為高毒優(yōu)良菌株的篩選提供了實(shí)驗(yàn)方向和科學(xué)依據(jù)。
　　不同的宿主具有不同的最適宜孢子濃度，要根據(jù)具體的