rhPTH(1-34)對成骨細(xì)胞增殖、CollagenI及OsterixmRNA表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　 觀察間歇給予重組人甲狀旁腺激素（1-34）[rhPTH(1-34)]對體外成骨細(xì)胞增殖、I 型膠原蛋白（Collagen I）及Osterix mRNA表達(dá)的影響，初步探討rhPTH（1-34）對體外成骨細(xì)胞的作用機(jī)制，為臨床用藥提供一定的理論依據(jù)。
　　 方法：
　　 1、體外培養(yǎng)成骨細(xì)胞，并觀察其形態(tài)和功能。
　　 2、以新生大鼠成骨細(xì)胞為體外實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停瑢⒊晒羌?xì)胞分為空白對照組和10-1

2、1、10-10、10-9、10-8、10-7M rhPTH（1-34） 5個(gè)不同劑量的給藥組，以24小時(shí)為一個(gè)培養(yǎng)周期，僅在前12小時(shí)加rhPTH（1-34），48小時(shí)后，采用MTT 法檢測細(xì)胞的增殖，用半定量RT-PCR法測定成骨細(xì)胞Collagen I、Osterix mRNA的表達(dá)。
　　 3、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，各組總體上有無差別采用單因素方差分析，

3、組間兩兩比較采用LSD 法分析，P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 1、體外培養(yǎng)的新生大鼠成骨細(xì)胞多為梭形，三角形或不規(guī)則的多邊形，胞核呈圓形或橢圓形，居中或偏于一側(cè)，周圍細(xì)胞以突起相連。堿性磷酸酶染色呈陽性反應(yīng)，胞漿呈灰黑色顆粒；茜素紅染色呈深紅色結(jié)節(jié)。
　　 2、不同濃度的rhPTH（1-34）作用于成骨細(xì)胞后，各組OD值均增高，在10-11-10-9M呈劑量依賴關(guān)系，以10-9M 增殖最高。對

4、照組與實(shí)驗(yàn)組，實(shí)驗(yàn)組組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　 3、不同濃度的rhPTH（1-34）作用于成骨細(xì)胞后，Collagen I及Osterix mRNA表達(dá)增加，光密度比值增加，在10-11-10-9M呈劑量依賴關(guān)系，以10-9M表達(dá)最高。對照組與實(shí)驗(yàn)組，實(shí)驗(yàn)組組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 1、重組人甲狀旁腺激素（1-34）可以促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖。