rhPTH1-34對成骨細胞增殖及BMP-7和BMP-9基因表達的影響.pdf

1、【目的】
　　 研究重組人甲狀旁腺激素1-34 （recombinant human parathyroidhormone1-34，rhPTH1-34）在體外對乳鼠顱蓋骨成骨細胞增殖及骨形態(tài)發(fā)生蛋白-7 （bone morphogenetic protein-7，BMP-7）、骨形態(tài)發(fā)生蛋白-9 （bonemorphogenetic protein-9，BMP-9）基因表達的影響，探討rhPTH1-34作用于成骨細胞的機制，為臨

2、床用藥提供進一步的理論依據(jù)。
　　 【方法】
　　 1.培養(yǎng)乳鼠成骨細胞，并觀察其形態(tài)及功能。
　　 2.以乳鼠成骨細胞為體外試驗?zāi)Ｐ?，采用噻唑藍（MTT）法檢測24小時后，通過不同濃度的重組人甲狀旁腺激素（rhPTH1-34）（0、10-11、10-10、10-9、10-8、10-7mol/l）作用于成骨細胞，觀察增殖能力并測定OD值。
　　 3.不同濃度的重組人甲狀旁腺激素（rhPTH1-34）（0、

3、10-11、10-10、10-9、10-8、10-7mol/l）作用于乳鼠成骨細胞，通過RT-PCR 法檢測成骨細胞BMP-7、BMP-9基因的表達。
　　 4.統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計學(xué)軟件對實驗數(shù)據(jù)進行處理分析，數(shù)據(jù)以x±s表示。各組總體上有無差別采用單因素方差分析，組間兩兩比較用LSD-T檢驗。P<0.01有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 【結(jié)果】
　　 1.體外培養(yǎng)的乳鼠成骨細胞大多呈長梭形，堿性磷酸酶染色

4、呈陽性反應(yīng)，胞漿呈灰黑色，茜素紅染色呈紅色陽性鈣化結(jié)節(jié)。
　　 2.間歇性小劑量重組人甲狀旁腺激素（rhPTH1-34）（0、10-11、10-10、10-9、10-8、10-7mol/l）作用于成骨細胞24小時后，可明顯促進成骨細胞的增殖能力，OD值顯著增加（P<0.01），對照組與實驗組，實驗組組間比較，統(tǒng)計學(xué)差異均有顯著性（P<0.01）。
　　 3.采用半定量RT-PCR 方法測定BMP-7、BMP-9基因的表達

5、。結(jié)果顯示，間歇小劑量給予重組人甲狀旁腺激素（rhPTH1-34）可促進成骨細胞BMP-7、BMP-9基因表達的能力，且濃度為10-9 mol/l時，成骨細胞BMP-7、BMP-9基因表達明顯升高，且光密度比值顯著增高。對照組與實驗組，實驗組組間比較，均有顯著性統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。
　　 【結(jié)論】
　　 1.間歇性小劑量重組人甲狀旁腺激素（rhPTH1-34）可促進成骨細胞增殖。
　　 2.間歇性小劑量重