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文檔簡介
1、目的:氧化損傷被認為是皮膚光損傷形成的核心原因。皮膚暴露于紫外線(ultraviolet,UV)時產(chǎn)生大量活性氧(Reactive Oxygen Specie,ROS)。當ROS增高水平超過皮膚抗氧化體系的防御清除能力,機體不能充分清除ROS時,累積的ROS造成細胞內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸等大分子物質(zhì)氧化損傷,從而導致一系列急慢性損傷表現(xiàn)。外用抗氧化劑主要通過清除ROS來減輕氧化損傷,從而起到抗炎、抗光損傷的作用。蝦青素(astaxanthin,
2、Asx)是一種類胡蘿卜素,具有強抗氧化活性。本實驗通過外用蝦青素脂質(zhì)體(astaxanthin liposomes,Asx-lipo)干預中波紫外線(Ultraviolet B,UVB)誘導的小鼠皮膚光損傷過程,對比維生素E脂質(zhì)體(Vitamin E liposomes,VitE-lipo),以明確Asx-lipo與抗小鼠皮膚光損傷的相關(guān)性,并初步探討其作用機理。
方法:將80只C57BL/6J小鼠隨機分為8個組,即空白組、模
3、型組、基質(zhì)Ⅰ組、基質(zhì)Ⅱ組、VitE-lipoⅠ組、VitE-lipoⅡ組、Asx-lipoⅠ組、Asx-lipoⅡ組(Ⅰ組代表每次照光前外用相應脂質(zhì)體,Ⅱ組代表每次照光后外用相應脂質(zhì)體)。各組給于相應的外用藥物及光照干預,2周后取標本并檢測以下指標:
(1)HE染色觀察皮膚組織學變化,測量其表皮、真皮厚度;
(2)免疫組化法檢測皮膚細胞增殖活性標志物Ki-67及DNA氧化損傷標志物8-OHdG表達情況;
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4、3)分別用WST法和可見光法測定皮膚抗氧化酶SOD、CAT活性;
(4)用ELISA法測定血清中MMP-13含量。
實驗數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學分析使用SPSS20.0軟件。數(shù)據(jù)采用?X±S表示,組間差異使用單因素方差分析方法檢驗,P<0.05提示具有統(tǒng)計學差異。
結(jié)果:(1)模型組與空白組相比,小鼠照光區(qū)皮膚出現(xiàn)明顯的脫屑、松弛、彈性下降、毛細血管擴張等改變,病理染色提示表皮及真皮增厚、膠原纖維細長、排列疏松紊亂,皮
5、膚Ki-67及8-OHdG表達量明顯增加,差異具有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01);(2)Asx-lipoⅠ組、Asx-lipoⅡ組、VitE-lipoⅠ組、VitE-lipoⅡ組與空白組相比,表皮及真皮增厚,皮膚Ki-67及8-OHdG表達量增加,SOD及CAT活性降低,血清MMP-13含量升高,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);與模型組相比,這四組皮膚外觀及病理改變均得到一定改善,皮膚Ki-67及8-OHdG表達量減少,SOD及CA
6、T活性升高,血清MMP-13含量降低,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);(3)Asx-lipoⅠ組與Asx-lipoⅡ組相比,表皮及真皮增厚程度減輕,Ki-67表達量降低,CAT活性增高,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);VitE-lipoⅠ組與VitE-lipoⅡ組相比,真皮增厚程度減輕,Ki-67表達量明顯降低,SOD及CAT活性增高,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);Asx-lipoⅠ組與VitE-lipoⅠ組相比差異不具有
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