枸杞葉總黃酮對UVB照射致無毛小鼠皮膚光損傷的防護(hù)作用研究.pdf

1、研究表明，許多天然成分的黃酮類化合物具有抗氧化、抗光敏和抗炎性損傷等作用，可以清除皮膚中的自由基，避免其對皮膚細(xì)胞的損傷作用。UVB（中波紫外線）是引起紫外線輻射導(dǎo)致皮膚損傷最主要的原因。UVB輻射導(dǎo)致人體皮膚的光損傷與活性氧簇（ROS）造成的氧化應(yīng)激有關(guān)，ROS一方面致使線粒體損傷凋亡和DNA突變等促使一些炎癥因子的釋放，另一方面或直接導(dǎo)致了皮膚發(fā)生紅斑、水皰等曬傷反應(yīng)。皮膚光損傷是人們普遍關(guān)注的熱點(diǎn)問題，對它的防治進(jìn)行研究十分有必要

2、，研發(fā)天然有效的抗氧化劑，對于延緩皮膚衰老以及預(yù)防紫外線輻射導(dǎo)致的皮膚光損傷有重要意義。枸杞葉有極高營養(yǎng)價(jià)值與藥用價(jià)值，其中含有大量總黃酮，枸杞葉總黃酮作為一種天然來源的黃酮類化合物，將其外用于皮膚表面，是否能對預(yù)防由紫外線引起的皮膚光損傷起作用，目前國內(nèi)外鮮有報(bào)道。目的：1.建立無毛小鼠急性紫外損傷模型。2.觀察脫毛小鼠外用枸杞葉總黃酮乳膏后，UVB輻射對皮膚外觀、皮膚最小紅斑量（MED）、皮膚組織結(jié)構(gòu)、皮膚超氧化物歧化酶（SOD）、

3、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）和過氧化氫酶（CAT）活性以及丙二醛（MDA）和羥脯氨酸（Hyp）的含量的影響。方法：1.采用研和法制備水包油型枸杞葉總黃酮乳膏制劑。2.用6％Na2S脫毛，恢復(fù)2天后，UVB照射小鼠背部脫毛區(qū)域的皮膚，以照射時(shí)間和小鼠背部皮膚變化為基準(zhǔn)，確定小鼠急性紫外損傷模型。3.將脫毛后小鼠隨機(jī)分成6組，除空白對照組外，其余組進(jìn)行UVB照射2h/天，連續(xù)照射兩周造成皮膚紫外損傷模型，紫外模型組直接照射 U VB，

4、基質(zhì)組照射前涂抹等劑量乳膏基質(zhì)，給藥組照射前分別在裸露背部皮膚處外用低、中、高劑量的枸杞總黃酮乳膏。4.每隔2天照射前稱量小鼠體重，每天觀察小鼠背部皮膚變化，第14天根據(jù)評分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評分，分別在第1天和第14天UVB照射前，測定MED。5.第14天照射結(jié)束后立刻處死小鼠，取背部輻照區(qū)皮膚，制片后進(jìn)行HE染色，光鏡下觀察小鼠皮膚組織形態(tài)學(xué)的改變；采用紫外分光光度法測定皮膚組織中超SOD、GSH-Px和CAT活性以及MDA和羥脯氨酸Hyp的

5、含量。結(jié)果：1.小鼠體重變化：紫外照射后，紫外模型組小鼠體重增長緩慢，差異不顯著。2.小鼠背部皮膚外觀變化：紫外模型組與空白組相比，小鼠背部照射區(qū)域皮膚外觀評分明顯增高(P<0.01)，與基質(zhì)組相比，評分則無明顯變化(P>0.05)；枸杞葉總黃酮高劑量組與紫外模型組相比，評分明顯降低（P<0.01）。3.小鼠背部皮膚最小紅斑量（M ED）：紫外模型組與空白組相比，最小紅斑量無明顯變化（P>0.05）外用枸杞葉總黃酮乳膏14天后，可見小鼠

6、背部皮膚最小紅斑量與模型組相比較，均明顯增多（P<0.01），且高劑量組SPF=20。4.小鼠皮膚病理切片HE染色后，光鏡觀察發(fā)現(xiàn)模型組病理切片呈現(xiàn)光老化狀態(tài)，有炎癥反應(yīng)；與模型組比較，枸杞葉總黃酮高劑量組皮膚組織病理切片可見光損傷程度減輕。5.小鼠皮膚組織中生化指標(biāo)測定結(jié)果：與空白組相比，模型組小鼠背部皮膚組織MDA含量增高，Hyp含量降低，SOD、GSH-Px和CAT活性明顯降低（P<0.01）；與模型組比較，外用高劑量枸杞葉總黃酮