黃芩苷、槲皮素對(duì)LPS致小鼠蛻膜細(xì)胞損傷的保護(hù)作用.pdf

1、分類號(hào)：$8572密級(jí)：公玨單位代碼：10086學(xué)號(hào)：2QQ塑旦2黃芩苷、槲皮素對(duì)LPS致小鼠蛻膜細(xì)胞損傷的保護(hù)作用ProtectiveEffectsofBaicalinandQuercetinonDecidualCellsofLP’SInducedAbortionMice學(xué)位申請(qǐng)人：指導(dǎo)教師：學(xué)科專業(yè)：學(xué)位類別：授予單位：答辯日期：木二云唇字五巨昱鐘秀會(huì)教授臨床獸醫(yī)學(xué)農(nóng)學(xué)碩士河北農(nóng)業(yè)大學(xué)二。一二年五月二十七日摘要本試驗(yàn)旨在研究黃芩苷、

2、槲皮素對(duì)LPS致蛻膜細(xì)胞損傷的保護(hù)作用。本文通過(guò)三部分實(shí)驗(yàn)來(lái)探討黃芩苷、槲皮素對(duì)蛻膜細(xì)胞的保護(hù)作用及其相關(guān)機(jī)制。一、通過(guò)體外細(xì)胞培養(yǎng)直觀的觀察兩種藥物的保護(hù)作用。首先對(duì)小鼠子宮蛻膜細(xì)胞的培養(yǎng)方法進(jìn)行了改進(jìn)，通過(guò)植塊培養(yǎng)與復(fù)合酶消化的傳統(tǒng)方法比較證實(shí)了植塊培養(yǎng)法的優(yōu)點(diǎn)，為下一步試驗(yàn)進(jìn)行奠定了基礎(chǔ)；在確定LPS對(duì)蛻膜細(xì)胞損傷作用濃度時(shí)，我們選用了以下LPS的濃度l、10、50、100、500、1000ng／ml，通過(guò)觀察損傷結(jié)果，100ng

3、／mlLPS可導(dǎo)致50％細(xì)胞損傷故作為損傷模型濃度確定下來(lái)；黃芩苷中劑量4lag／mlLPS、槲皮素中劑量25umol／LLPS加入細(xì)胞中與空白組和模型組對(duì)比，觀察細(xì)胞的存活率，結(jié)果顯示加藥保護(hù)細(xì)胞存活率均比模型組高。其中槲皮素的效果較黃芩苷的明顯。二、通過(guò)體內(nèi)給藥造模及口服灌胃給予黃芩苷及槲皮素的方法來(lái)進(jìn)行其保胎藥效研究。孕6天小鼠40只隨機(jī)分為8組，每組5只，第一組為空白組，不做任何處理，第二組為模型組(孕6天尾靜脈注射5ug／ml

4、LPSO1ml／109)，第三組、第四組、第五組為黃芩苷、高中、低治療組(第6天造模，第7、8天各組灌胃黃芩苷O1ml／109，濃度分別為25mg／ml、125mg／ml、025mg／m1)，第六組、第七組、第八組為槲皮素高、中、低治療組(第6天造模，第7、8天各組灌胃槲皮素O1ml／109，濃度分別為25mg／ml、125mg／ml、025mg／m1)，以上各組孕9天剖殺，眼球取血測(cè)量血清中TNFQ及孕酮的含量；稱量子宮凈重，數(shù)每組吸

5、收胎兒個(gè)數(shù)及著床總數(shù)，計(jì)算吸收率；HE染色觀察子宮蛻膜的病理變化。結(jié)果顯示，LPS可致孕鼠的吸收率為30％；黃芩苷、槲皮素均可減少胚胎的吸收率并增加因胚胎吸收造成的重量減輕、并能修復(fù)受損的蛻膜組織；黃芩苷、槲皮素高劑量組可顯著降低由LPS刺激單核細(xì)胞引起的炎癥因子TNF—a表達(dá)的增高(P001)；孕酮含量各組差異不顯著。三、免疫組化檢測(cè)蛻膜細(xì)胞中凋亡蛋白Caspase一3的表達(dá)，我們?cè)噲D從基因水平闡明自然流產(chǎn)與細(xì)胞異常凋亡及基因家族的關(guān)

6、系，為探討自然流產(chǎn)的機(jī)制和中藥保胎的藥理作用提供新認(rèn)識(shí)。通過(guò)SABC免疫組化及AEC顯色的方法檢測(cè)空白組、模型組、黃芩苷中高治療組、槲皮素中高治療組蛻膜組織中Caspase一3的表達(dá)，計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)和統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果顯示，LPS顯著增加Caspase3(PO01)的表達(dá)，黃芩苷、槲皮素均可有效降低蛻膜組織中Caspase。3的表達(dá)(P001)。槲皮素對(duì)Caspase3有雙向調(diào)節(jié)作用，高劑量應(yīng)用會(huì)使Caspase一3的表達(dá)增加。結(jié)論：黃芩苷