綠針假單胞菌XF10對煙草黑脛病菌的拮抗作用研究.pdf

1、由寄生疫霉煙草致病變種[Phytophthoraparasitica var.nicotianae(Breda de Haan)Tucker]引起的煙草黑脛病是煙草生產(chǎn)中危害極其嚴重的一類根莖病。為了豐富煙草黑脛病拮抗細菌菌株資源，有效利用生物防治方法控制煙草黑脛病，在煙草黑脛病發(fā)病嚴重地塊的健株根際周圍選取土壤樣品300份，篩選獲得了對煙草黑脛病菌有明顯拮抗作用的生防菌株XF10，對該菌株進行鑒定，并就其對煙草黑脛病菌的拮抗作用進行研

2、究，主要研究如下:
　　1.將土壤樣品通過平板稀釋法、噴施病原指示菌初篩、平板對峙培養(yǎng)復(fù)篩等方法獲得了CY106、XF10、CY110三株對煙草黑脛病菌有明顯拮抗作用的細菌。其中XF10對煙草黑脛病菌的抑制率最高，為83％;盆栽試驗結(jié)果顯示，XF10菌株對煙草黑脛病相對防治效果最好。通過不同菌種保存方法對XF10菌株抑菌活性的影響，確定最佳保存方法為-80℃甘油保存。
　　2.經(jīng)生理生化特性觀察、BIOLOG自動微生物鑒定系

3、統(tǒng)、16S rDNA基因序列分析，結(jié)果確定XF10為假單孢菌屬綠針假單胞菌（Pseudomonas chlororaphis）。
　　3.通過研究培養(yǎng)時間、溫度、pH對XF10菌株的影響，探明XF10菌株最佳培養(yǎng)時間72h、最適生長溫度為31℃、最適pH為7.5。
　　4.XF10菌株的菌懸液以及發(fā)酵上清液對煙草黑脛病菌的抑制率均達80％以上。XF10菌株能夠抑制煙草黑脛病菌菌絲正常生長，進一步分析結(jié)果表明，該菌株能夠產(chǎn)生纖

4、維素酶和蛋白酶。
　　5.XF10菌株菌懸液以及發(fā)酵上清液對煙草黑脛病菌菌量生長、孢子囊產(chǎn)生、孢子囊釋放、游動孢子萌發(fā)均能起到很好的抑制作用，其中作用最明顯的處理是加入5mL菌株菌懸液，對菌絲生長量的抑制作用明顯;對孢子囊的產(chǎn)生抑制率達95.6％;孢子囊釋放最高相對抑制率達86.7％;對游動孢子的萌發(fā)也具有一定的抑制作用，放置24h抑制率為58.2％。
　　6.通過平板對扣法測定XF10菌株揮發(fā)性產(chǎn)物對煙草黑脛病菌的抑制作用