輔酶NAD(P)H自發(fā)熒光在細胞內(nèi)的觀測.pdf

1、新陳代謝是生命活動的基礎,是生命活動最重要的特征。研究活細胞中新陳代謝的情況對分析細胞活性和生命活動有重要意義,NAD(P)H自發(fā)熒光是表征細胞內(nèi)新陳代謝的一個指標,可以通過熒光顯微鏡來探測細胞內(nèi)NAD(P)H分布和變化情況?；跓晒獬上窈凸庾V技術的,觀測活細胞和活組織內(nèi)的生物熒光現(xiàn)象,是現(xiàn)今光生物學研究領域的重要課題。熒光顯微鏡在生命科學領域的廣泛運用,為探索生物提供了有利地手段。運用奧林巴斯IX2-DSU——轉(zhuǎn)盤式共聚焦顯微鏡(Di

2、sk Scanning Biological Microscope)可以滿足實驗中的總體需求。為了保證實驗的順利進行,分辨率、靈敏度、成像速度、光漂白等因素都應經(jīng)過慎重選擇和考慮。近年來也有研究表明在嗜中性粒細胞、巨噬細胞和某些腫瘤細胞中,可以觀測到周期性振蕩的存在。從物理學角度考慮,時空的結(jié)構(gòu)存在于許多物理、化學、生物的狀態(tài)之中。當一個化學系統(tǒng)遠離平衡態(tài)時,這個系統(tǒng)就會不穩(wěn)定,并且自發(fā)地形成一些時間和空間結(jié)構(gòu),即耗散結(jié)構(gòu)。這種表征新陳

3、代謝的耗散結(jié)構(gòu)存在一定的普遍性,細胞系(株)之間存在的差別和具體作用機理都是這方面研究的關注點。
　　 本文在前人對嗜中性粒細胞的NAD(P)H自發(fā)熒光的研究基礎上,我們發(fā)現(xiàn)在RBL-2H3細胞的細胞質(zhì)中也能觀察到NAD(P)H波的存在,這一點也證實:這樣的新陳代謝結(jié)構(gòu)在細胞中是普遍存在的。同時,我們還發(fā)現(xiàn)NAD(P)H波的存在和移動與NAD(P)H的分布有密切聯(lián)系。當NAD(P)H主要分布在細胞質(zhì)中,NAD(P)H就有了形成的

4、基礎。當在另外一些細胞中NAD(P)H主要被局限于線粒體中時,表征細胞新陳代謝的NAD(P)H振蕩此時將由細胞質(zhì)中的存在轉(zhuǎn)換成在線粒體中存在。外界物理因素對生物體的新陳代謝有重要影響。溫度往往是考量生物體對外界敏感度的一個參數(shù)。我們研究發(fā)現(xiàn):RBL-2H3細胞的NAD(P)H自發(fā)熒光在不同溫度下的熒光強度會有一定變化。隨著溫度的升高,處在分裂期的細胞NAD(P)H熒光強度有大幅度的降低;而處在分裂間期的細胞的NAD(P)H熒光強度沒有明