細胞內(nèi)微核的檢測

1、實驗（3）遺傳病的分析2,細胞內(nèi)微核的檢測系譜分析,細胞內(nèi)微核的檢測,,原 理,環(huán)境中有害物質(zhì)可導致細胞中染色體或紡錘體的損傷，產(chǎn)生的染色單體或無著絲粒染色體片斷在細胞分裂末期滯留于子細胞胞質(zhì)中，形成微核。,原 理,本實驗選用培養(yǎng)細胞，用環(huán)磷酰胺作誘導劑（射線、順鉑等） ，促使細胞中染色體斷裂，產(chǎn)生微核。 微核經(jīng)Giemsa染色后呈紫紅色，胞質(zhì)被染成淡灰藍色。,器材與試劑,顯微鏡、載玻片、染色缸、滴管等培養(yǎng)細胞（小

2、蓋片） 甲醇固定液PBS（pH7.4）Giemsa應用液（臨用現(xiàn)配） Giemsa原液：PBS＝1：9混合而成。,操 作,培養(yǎng)細胞（小蓋片）——加環(huán)磷酰胺1mg/ml——PBS洗滌3次——甲醇固定5min——Giemsa染色5min——自來水沖洗——顯微鏡下觀察——計數(shù),24h,微核的計算,先用低倍鏡粗檢，后用高倍鏡，選擇細胞分布均勻，細胞無損，著色適當?shù)膮^(qū)域，計數(shù)。 每張玻片計數(shù)100-200個細胞，按