疏棉狀嗜熱絲孢菌Thermomyces lanuginosus超氧化物歧化酶的分離純化及性質(zhì)研究.pdf

1、山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文疏棉狀嗜熱絲孢菌Thermomyceslanuginosus超氧化物歧化酶的分離純化及性質(zhì)研究姓名：高靜申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：植物病理學(xué)指導(dǎo)教師：李多川2003.6.11山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要疋，—文超載他物歧能酶(SuperoxideDismutase，簡稱SOD)(EC11511)系～類衾瘸酶，廣泛存在予生物體孛。它能夠催毒乏超鬣弱離予(Oh發(fā)生歧化反應(yīng)，從而清除怒氧陰離子。在警物體防御氧純矮傷的避程

2、中，發(fā)撂著重贅佟翅。校撂酶分子孛鼴食金震輔基熬苓弱，超戴純耪鼗鍵酶主鼗可分為CuZnSOD(存在于真核生物)，MnSOD(存程予暴梭生物窩糞45“(2～50“C懿褰滾下攫好瓣繁蓬壘長。磷絕大多數(shù)茨真核耋l三魏囂長羯暴繕予40℃奠上將無法存活。在嗜熱藩領(lǐng)域，對超葷e純耪竣稼酶靜磅究還不多，拳擎裂是在驤穆狀囔蕊絲獠蓬塑纜驗登型黧堡塑醴燮塑等噻熱真熬上，糖漿磷究還來覓掇遵。X／＼本文瓣驤穗狀嗜燕絲凝菌獺搿能刪蚪豁lanuginosus產(chǎn)生熬越

3、氧純辮歧化酶讖行了分離純化放性質(zhì)磷究。粗酶液依次進(jìn)行50％和65％硫酸鍛分緩分勰瀛淀，DEAESepharose溪離予交換較鼷褥，PhenylSepharose璇求柱層析酷及SephacrylS100分子篩鼷轎后，獲得了SDS聚落烯酰黢凝獲毫泳(SDS—PAGE避榮攀一熬超氧弦秘歧純憋。在零硬究豹整個分鬻縫化過稔中，酶靜芘活力出最初靜65。3U／mg舞離至《最終靜1769。2U／mg，縫伍蟄數(shù)鴦27?！蕖j分別甩SDS聚丙烯酰胺濺膠電

4、泳(SDSPAGE)的方法和SephacrylS100凝膠遘濾篷褥豹方法，溺定窶零番囂窕舞獲器爨趣揀鞋：耪跛純酶熬分子量分剮為224kDa和891kDa。證明在本研究中所得磷的超氯純物玻億酶是一糨鑫穩(wěn)鬻嬤4個篷基爨穆或熬蛋是矮。本鹺究黲褥到豹越襞純甥歧純酶的蕊應(yīng)最遺滾度為55“C，麓的反應(yīng)最適p至值為80。露辯，該越羲傳物竣健驁逛瑟竅較好黲熱穩(wěn)遨蛙幫p聯(lián)篷穩(wěn)定性。褒pH璧必80熬蘩率下，浚酶在50“C察604C瞳是鏊本穩(wěn)定豁，在60X2